[DEBUG-WINDOW 처리영역 보기]
즐겨찾기  |  뉴스레터  |  오늘의 정보 회원가입   로그인
BRIC홈 실험
벡톤디킨슨코리아
배너광고안내
이전
다음
스폰서배너광고 안내  배너1 배너2 배너3 배너4
BioLab 김한준 교수
전체보기 안전점검 LABox
 전체 > Microbiology > Bacteria
조회 393  스크랩 인쇄하기 주소복사 트위터 공유 페이스북 공유 
질문 blue-white screening 실험에서 전기영동을 하는 이유가 뭔가요?
알솜이언뉘(대학생)  | 03.24 20:28

저번 실험에서 t-vector와 ligation을 해서 새로운 vector를 만들었습니다.

그 vector에 insert DNA가 잘 들어갔는지 확인하는 실험을 했습니다.

Colony에서 white와 blue colony를 각각 넣은 pre-mix를 PCR 진행해주었는데, PCR을 진행하는 이유가 뭔가요?

그리고 white colony를 넣은 pre-mix를 전기영동해주면, band가 나오는데 blue colony를 넣은 pre-mix를 전기영동해주면, band가 나오지 않더라구요

만약 insert DNA가 삽입이 되면 lacZ가 발현되지 않아 b-galactosidae가 분비되지 않아 x-gal이 분해되지 않아 white colony가 생성 되는 것까지는 이해가 되는데 왜 전기영동시 band가 나오지 않는건가요?

#blue-white screening
 
#lacZ
 
#Colony PCR
답변하기
답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
개구리실험조아  |  03.24 21:52  
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.
blue-white screening은 1차적으로 vector에 DNA가 insert 되었는지를 확인합니다.
잘 아시다시피 insert된 경우는 콜로니가 흰색이고 그렇지 않은 경우는 파란색이라고 육안으로 확인하죠.

PCR은 이를 다시 분자적 관점에서 확인하기 위함입니다. 흰색은 해당 유전자가 들어 있으므로 pcr되어 밴드 형태로 보이고 파란색은 들어있지 않으므로 당연히 밴드가 안뜹니다.

하지만 흰색으로 보여도 더 기르다 보면 파랗게 변하는 경우도 있고, 아주 낮은 가능성으로는 엉뚱한 DNA가 들어가는 경우도 있어서 후속으로 다른 확인법이 필요합니다.
답변하기
할인행사/신제품신기술 광고 검색광고
인성크로마텍 인성크로마텍
[Kd & Conc.] 항원/항체 고정 및 정제 과정 없이 결합 친화도(Kd) 및 농도(Conc.)를 동시에..
그린메이트바이오텍 그린메이트바이오텍
[TECAN한국공인대리점] TECAN 자동화장비 봄맞이 상담 이벤트!! (6.9까지)
인성크로마텍 인성크로마텍
[다중 면역형광 이미징 시스템] ORION™ 한번의 면역염색 및 스캔으로 20 여 개의 바이오마커 동시 분석
그린메이트바이오텍 그린메이트바이오텍
[TECAN 한국공인대리점] TECAN Microplate reader/ IMPLEN Nanophotomet.. (7.31까지)
필코리아테크놀로지 필코리아테크놀로지
물질 상호작용 분석기 : Creoptix WAVE delta
필코리아테크놀로지 필코리아테크놀로지
세계적인 CRISPR 기업인 SYNTHEGO사에서 제공하는 초고속 Knockout Cell 제작 서비스! (12.31까지)
최근등록   더보기 >
치아 상아질 재생 하이드로겔 제조 실험 의뢰드릴 수 있을까요?   05.31
HPLC 이동상 여과   05.31
zebrafish neurobehavior   05.31
웨스턴 뭐가 잘못된걸까요   05.31
Protein pH 변화   05.31
DNA 전기영동 실패 원인 분석 좀 해주세요ㅠㅠ   05.31
Annexin V Assay cell aggregation이 되는 것 같은데 어느 단계에...   05.31
Adipocyte 분화 시 lipid droplet으로 추정되는게 떨어집니다.   05.31
HEK-293T lipofection   05.31
Linker sequence 연결하는 Overlap PCR 문의드립니다   05.31
최근답변자 우수답변자
올챙이CHM91

알Biology123

대왕개구리SPEED

알오늘은또

알boulardii

올챙이해조칼슘풍덩

개구리차몬드

개구리CBD 김선..

개구리cslee

꽃개구리TX

개구리애니

개구리Daegu*

개구리미가微家

개구리ExDown's

대왕개구리엘피스

대왕개구리강시

실험관련연재
세오 연재중실전 실험 프로토콜 101
세오 (필명) (Cincinnati Children’s Hospital Medical Center)
신코 연재중분석장비 이야기
분석장비 탐험가 (필명) ((주)신코)
곽민준 연재중랩노트
곽민준 (POSTECH 생명과학과)
박은총 연재마감후배에게 주고 싶은 면역학 노트
박은총(Duke University)
Mr.S 연재마감의학계의 Spectaculum: 임상시험
Mr. S (필명) (연세대학교)
에스프리 연재마감실험을 해봅시다
에스프리 (필명)
이제욱 연재마감생명과학자 기초체력 다지기
이제욱 (오송첨단의료산업진흥재단, 신약개발지원센터)
위로가기
실험 홈  |  실험FAQ
 |  BRIC소개  |  이용안내  |  이용약관  |  개인정보처리방침  |  이메일무단수집거부
Copyright © BRIC. All rights reserved.  |  문의
트위터 트위터    페이스북 페이스북   유튜브 유튜브    RSS서비스 RSS
에펜도르프코리아 광고