자대에서 인턴 중인 학부생입니다
1. 아크릴아마이드젤 만들고 sds-page하고 transfer하고 blocking하려할 때 membrane에 옮겨진 걸 보면 거의 1/2 확률로 %가 잘 맞지 않습니다
분명히 7.5%를 만들면 7%로 만들어졌는지 제가 관찰하고자하는 36kda 마커가 보이지 않고 12%를 만들면 10%로 만들어졌는지 50kda이 보이지 않아서 재실험을 해야할 때가 많습니다
만들 때 pipette aid로 만들고 오차가 날까 싶어서 10ml로 안하고 5ml로 만드는데 만들 때마다 그러니 참... 눈치가 보입니다 troubleshooting 어떻게 해야할까요?
2. 이 부분은 정말 가끔 발생하는데 running gel을 만들고 isopropanol로 산화되는 것을 막는데 잘 굳었나 확인하면 왼쪽 혹은 오른쪽(거의 왼쪽에서 발생) side에서 gel이 녹은 듯이 한 쪽 부분이 내려가있더라구요
gel 만들고 tube에 냅뒀다가 굳은지 확인하면 뿌옇게 되는 것처럼 glass에도 뿌옇게 되어있고 왼쪽 부분이 녹은 것처럼 되어있고 isopropanol도 샜는지 날라간 것 같아보이더라구요
처음에는 isopropanol이 문제인가? 해서 새걸로 했는데도 그랬고 다른 gel 만드는 solution이 오래돼서 그런가? 해서 그것 또한 새로 바꾸고 만들었는데도 가끔씩 발생하더라구요 이런 경우는 무슨 경우일까요? ㅠㅠ
|