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 전체 > Molecular Biology-Protein > Western Blot Analysis
조회 411  스크랩 인쇄하기 주소복사 트위터 공유 페이스북 공유 
질문 western 실험시 streptavidin-HRP 사용에 관해 질문이 있습니다.
올챙이열심히 하자(대학원생)  | 03.29 13:06

안녕하세요

biotinylation된 단백질을 western으로 detection하려고합니다.

저는 streptavidin 1차 안티바디를 쓰고 웨스턴을 하려고했는데

streptavidin 자체에 HRP가 달린 제품도 있더라구요

이 제품사용시에는 1차-2차 안티바디 반응없이

transfer가 끝난 membrane을 streptavidin-HRP으로 incubation을 해주고 바로 ECL과 반응하면 되나요?

만약에 이 방식이 맞다면 원래 쓰는 antigen-antibody보다 과정이 줄어들어 편할 것 같긴한데 효율도 좋을지 여쭤보고자 글을 써봅니다.
#western blot
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
대왕개구리SPEED  |  03.30 00:07  
사용가능합니다.
올챙이열심히 하자  |  03.30 10:10  

답변 감사드립니다. 그러면 transfer가 끝난 membrane을 streptavidin-HRP으로 incubation을 해주고 바로 ECL과 반응하면 될까요?
대왕개구리SPEED  |  03.30 12:45  
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

- membrane washing을 1~2회 한 후 진행하면 될 겁니다.
개구리차몬드  |  03.31 11:07  

넵

biotin이 붙은 1차 항체를 먼저 membrane에 붙여주고,

streptavidin-HRP를 2차 항체로 membrane에 붙여준 뒤,

ECL를 뿌려 확인하시면 됩니다
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