실험 Q&A Immunology > ELISA
HEK-293T transfection 후 배지 수집 방법에 질문 있습니다.
레벨1 Chewi (대학원생)
안녕하세요
HEK 293T cell line에 plasmid를 형질감염 시킨 후 배지로 분비되는 단백질을 정제하는 실험을 하고 있습니다.
Transfection 후 주로 48h~72사이에 수집하여 실험에 사용한다고 들었습니다.
그런데 HEK293T 세포 특성상 빼지가 하루만에 주황색으로 변해서 이때 배지를 수집해주고 새배지를 넣어줘야할지, 아니면 배지가 주황색인 상태로 계속 분비단백질을 축척하고 수집하는 지 궁금합니다.
배지가 노란색이 되면 분비 단백질에 영향이 생기고 HEK세포 컨디션에도 문제가 있어 발현에 문제가 생길껏이라고 생각됩니다. 그대로 놔둬야 할까요?
매번 어류 세포만 만지다가 인간 세포주는 처음이라서....
혹시 HEK 293세포에 형질감염 실험 하시는 분들의 의견이 궁금합니다.
바쁘신데 긴글 읽어주셔서 감사합니다.
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