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 전체 > Molecular Biology-DNA > PCR/RT-PCR/Q-PCR
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질문 RT-PCR 질문입니다.
PCR초보  | 2009.04.27 14:01
답변있는 질문은 수정/삭제 불가(☞문의)
첨부파일 파일첨부: 8.jpg (32 KB)
이미지 첨부파일

이번에 3개 한set sample로
4가지 유전자와 b2-microglobulin에 대해 RT-PCR을 했습니다.

b2-microglobulin은 제가 논문에서 primer와 PCR조건을 그대로 따라했고
나머지는 그냥 b2-microglobulin과 같은 조건으로 PCR했습니다.

결과를 그림파일로 올렸습니다.
맨 마지막 set가 b2-microglobulin이고 하나의 밴드로 나왔는데
나머지 유전자들은 앞에 두개 유전자는 안나오고
뒤에 2개 유전자들만 나왔습니다.
그리고 4개 유전자 모두 밑에 non-specific band가 많이 떴습니다...
이런 경우는 어떻게 해야할까요

#PCR
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
개구리하늘을달려라  |  2009.04.27   

PCR도 primer에 따라, 또 증폭하고자 하는 size에 따라 조건이 많이 많이 다름니다.
한꺼번에 한번에 해버릴려고 하지마시고 좋은, 정확한 조건을 잡아서
다시 해보세요^^

개구리하늘을달려라  |  2009.04.27   
아 그리고 밑에 non-specific band는 통상 primer나 RNA등의 찌거기들일것인데
b2-microglobuln밑에는 non-specific band 가 없는것이로 보아
(같은 template를 사용했다는 가정하에)
조건이 안맞아서 합성이 안된 primer일거에요
너무 걱정마세요
PCR초보  |  2009.04.28    
감사합니다.
template는 같습니다...
그렇다면 조건 잡을때 이런 경우는 annealing temperature만 바꿔서
해보면 될까요?
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