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OD260/OD280 에서요. |
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Better | 2001.07.13 00:00
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답변있는 질문은 수정/삭제 불가(☞문의) |
Tri reagent를 이용하여 식물에서
RNA를 뽑은후..purity를 알아보기 위해
OD 값을 측정해보앗는데여..
OD260 = 0.083
OD280 = 0.02가 나와서..
OD260/OD280 이 4가 넘게 나옵니다..
일반적으로 책과 protocol등에는..
RNA 경우 1.9 정도면..purity가 높다고 언급되어있는데..
4가 넘어가는것은..문제가 있어보여서여..
이와 관련하여 아시는 분 답해주세여..미리 감사합니다~! |
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전기영동으로 확인하셔서 rRNA band들이 보이면 spectrometer가 맛이 간거구요..
만약 거의 끌리는 정도로도 안보이면,,, RNA의 농도가 너무 적은겁니다...
concentration시키던지... 아님 새로 뽑는것이 다음실험에 차질이 없겠네요..
그냥 지나가다가 썼습니다. |
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O.D. 값이 신뢰할 만한 수준이 아니라서 그런 장난이 나오는 겁니다.
농도가 너무 묽어서 그러니 좀더 진한 농도에서 측정하시오.
아무리 낮아도 0.3이상이 되는 조건에서 측정해야 할 것입니다. 지금은 아무런 의미가 없는 숫자 놀음이지요.
Good luck to your research.
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OD값을 100% 신뢰할 수 있는 것은 아니지만, purity가 4 이상이라면 다음 실험을 위한 RNA로서는 좀 무리가 있을것 같다는 생각이 드네요..
DNAse처리 한 번 해주시고 phenol→isoamyl처리 한번 해주시고 나서 다시 OD 값을 측정하셔야 할것 같네요..
OD 값이 계속 아래와 같이 나온다면 순수한 RNA라 생각하고 실험하기에는 무리가 있는것 같네요..그쳐?(다시 뽑으심이....^^;)
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