[DEBUG-WINDOW 처리영역 보기]
즐겨찾기  |  뉴스레터  |  오늘의 정보 회원가입   로그인
BRIC홈 실험
마크로젠
배너광고안내
이전
다음
스폰서배너광고 안내  배너1 배너2 배너3 배너4
미국 박사 유학 생존기
전체보기 실험 Q&A 안전점검 LABox
 전체 > Molecular Biology-DNA > PCR/RT-PCR/Q-PCR
조회 13595  스크랩 인쇄하기 주소복사 트위터 공유 페이스북 공유 
질문 Real time PCR 과 일반 PCR
PCR입문  | 2009.08.05 16:20
 답변있는 질문은 수정/삭제 불가(☞문의)
이제 PCR을 시작하는 초보입니다.

세포를 lysis 하여 RNA를 뽑은후 cDNA로 합성하여

Real time PCR을 했습니다. primer는 GAPDH, A, B 라는 gene 으로 하였을때

GAPDH와 비교하여 B는 거의 뜨지 않고 A라는 gene이 많이 발현되었습니다.

동일 sample로 일반 PCR을 하여 증폭시킨 뒤 agarose gel에 걸었습니다.

당연히 A라는 gene과 GAPDH가 진하게 band가 뜨길 바랬지만

B라는 gene까지 모두 비슷한 굵기로 band가 떳습니다.

이 현상은 왜 일어나는 건지 궁금합니다.

real time PCR protocol과 그냥 PCR protocol이 좀 다르긴 했지만

그래도 sample 입장에서는 같은 조건으로 PCR을 했기 때문에

상대적인 발현양 차이는 보여야 하는게 아닐까...하는게 제 짧은 소견입니다.

답변 부탁드리겠습니다 ^^
#PCR
 
#real time
 
#gene
 답변하기
답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
개구리겨우살이  |  2009.08.06   
Real time pcr 수행시 형광측정 온도를 ds DNA가 존재하지 않는 온도로 설정해서 그런 것이 아닐까요? real time pcr product로 전기영동을 걸어서 확인해 보시지요
ABC  |  2009.08.07    

일반 PCR시에 saturation된 것으로 생각되네요.
혹 cycle 수가 많았던 것은 아닌지요?

cycle 수를 줄여서 낮은 cycle부터 젤 로딩해 보세요.
PCR입문  |  2009.08.10    
답변 감사드립니다.
두 가지 다 고려해서 다시 해 보겠습니다
감사합니다^^
답변하기
할인행사/신제품신기술 광고 검색광고
필코리아테크놀로지 필코리아테크놀로지
TissueGnostics 의 HistoQuest 는 Single cell 수준의 Image Cytometr..
필코리아테크놀로지 필코리아테크놀로지
필코리아테크놀로지와 RNA sequencing을 통해 좋은 결과 만나보세요! (12.31까지)
그린메이트바이오텍 그린메이트바이오텍
[TECAN 한국공인대리점] TECAN Microplate reader/ IMPLEN Nanophotomet.. (4.11까지)
인성크로마텍 인성크로마텍
[BQC] 산화 스트레스(Oxidative Stress) 분석 / 세포 분석 / 조직 염색 키트 20% 할인 (4.28까지)
서린바이오사이언스 서린바이오사이언스
[Cell Signaling Technology] Conjugated Antibody 20% 할인 이벤트!! (4.30까지)
바이오닉스 바이오닉스
[TECAN No.1 한국공식대리점] TECAN 봄맞이 대행사! 견적 및 Demo 신청시 상품권 지급 (4.9까지)
최근등록   더보기 >
penicillin 넣을 용량 계산문제입니다.   03.30
프라이머 OD의미?   03.30
식물 추출 후 농축 과정에서 이물질 발생   03.30
OCVAR3 세포주 가지고 계신 분 있으실까요???ㅠㅠ   03.30
cell media 문의   03.30
EGFR wild type- primer design   03.30
부유세포   03.30
HPLC base line 들뜸 현상   03.30
MALDI Sample Prep을 위해 시료를 Serial Dilution할 때, 최종 부...   03.30
cell 길이 측정 / C2C12 분화도 측정   03.29
최근답변자 우수답변자
개구리실험조아

알연람

알Viiiiiii

대왕개구리SPEED

알미니이리

개구리Eigen

개구리cslee

개구리기적
대왕개구리엘피스

개구리Lucid

개구리ryan

청개구리SGPG

개구리flu...

개구리닥눈삼

개구리곰돌2

대왕개구리엘피스
실험관련연재
세오 연재중실전 실험 프로토콜 101
세오 (필명) (Cincinnati Children’s Hospital Medical Center)
신코 연재중분석장비 이야기
분석장비 탐험가 (필명) ((주)신코)
곽민준 연재중랩노트
곽민준 (POSTECH 생명과학과)
박은총 연재마감후배에게 주고 싶은 면역학 노트
박은총(Duke University)
Mr.S 연재마감의학계의 Spectaculum: 임상시험
Mr. S (필명) (연세대학교)
에스프리 연재마감실험을 해봅시다
에스프리 (필명)
이제욱 연재마감생명과학자 기초체력 다지기
이제욱 (오송첨단의료산업진흥재단, 신약개발지원센터)
위로가기
실험 홈  |  실험FAQ
홈  |  BRIC소개  |  이용안내  |  이용약관  |  개인정보처리방침  |  이메일무단수집거부
Copyright © BRIC. All rights reserved.  |  문의		 트위터 트위터    페이스북 페이스북   유튜브 유튜브    RSS서비스 RSS
엘앤씨바이오 광고