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웹진 Vol.24, No.10 (2022년 10월) 발간
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[한국쇼코츠쇼] [Shodex] 수용성비타민 B, C 동시분석
제품(기술)분류: 실험대행기술 > 기타
전화: 027845111
메일: yhshin(at).shokokorea.com
팩스: 02-784-5125

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상세정보 사용후기 회사정보 |  등록제품
  특징 및 규격  

기존 비타민을 분석하기 위해서는 미생물학적 정량법, 흡광광도법, HPLC 법 등을 사용하였습니다. 대부분 복잡한 전처리 과정 등이 필요하여 많은시간이 소요 되었습니다. 또한 HPLC와 ODS 컬럼을 사용하여 분석 할 경우 극성 물질인 비타민의 머무름을 증가시키기 위해 이온쌍 시약 (Ion-pair) 을 이동상에 첨가하여 분석해야 했습니다.

이온쌍 시약은 장비 내 Line 이나 컬럼에 잔류하면서 Baseline의 상승,  감도의 저하 등을 일으키는 원인이 되기도 했습니다.

이에 Shodex에서는 이온쌍 시약을 사용하지 않는 조건에서 Polymer based 컬럼인 Shodex RSpak DE-413컬럼을 사용하여 실제 시판되고 있는 멀티 비타민 복합제를 정량 분석하였습니다.

Standard Sample preparation

 

Biotin4 mM, 기타 비타민의 농도는 2 mM이 되도록

    250 mM Phosphoric acid에 용해하여 표준 용액을 조제

엽산, 비오틴, 리보플라빈은 소량의 10 % Ammonium

    수용액으로 사전에 용해시킨 후, 10 mM Phosphoric acid

    첨가하여 표준 원액을 조제

검량선용 표준액은 각 표준 원액을 적절히 혼합하여

     250mM Phosphoric acid으로 희석하여 제조

    (, 엽산은(Folic acid)는 고농도에서 몇시간 후

     석출되는 것이 확인되었기 때문에 20 μM상한치로 하였음)

 

Product Sample preparation

 

시판 멀티비타민 복합체 210mg

    5mL 250mM phosphoric acid 에 녹인 후 Sonication

② ①을 소량 취하여 200배 희석시킨 후 원심분리

    (10,000rpm x 5min) 하여 불순물을 걸러

엽산(Folic acid) 측정용 으로 곱게 간 멀티비타민 복합제

   10mg를 취하고 50μL 10% Ammonium 수용액에

   녹인 Sonication

10mg/mL 아스코르빈산 수용액에 250mM Phosphoric acid

    이용하여 5mL mass up (엽산 산화 방지)


Sample : 10 μL
1. Vitamin B1 200 µM
2. Vitamin B6 200 µM
3. Niacinamide 200 µM
4. Vitamin C 200 µM
5. Vitamin B3 200 µM
6. Vitamin B5 200 µM
7. Vitamin B12 200 µM
8. Vitamin B2 200 µM
9. Biotin 800 µM
10. Folic acid 20 µM

 

Columns      : Shodex RSpak DE-G 4A (4.6 mm I.D. x 10 mm) + DE-413 (4.6 mm I.D. x 150 mm)
Eluent       : (A); 10 mM H3PO4 aq./(B); CH3CN 
               High pressure linear gradient; 
               (B %) 0 % to 20 % (0 to 15 min), 20 % (15 to 16 min), 0 % (16.01 to 25 min)
Flow rate    : 1.0 mL/min
Detector     : PDA (190 - 400 nm)
Column temp. : 40 ℃

 

<Shodex RSpak DE-413 Column Spec Sheet>

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파일첨부 1 : (TA6) Simultaneous analysis of ten water-soluble vitamins using DE-413L ....pdf (395 KB)
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