1.타사 대비 루젠 렌티바이러스서비스의 장점은 무엇인가요?

▷㈜루젠에스씨아이는 국내유일 최장기간 렌티바이러스 및 관련 제품을 전문으로 제조해 온 기업입니다. 다년간의 렌티바이러스 제조서비스 노하우를 활용하여 제공되는 모든 바이러스 제품에 자사가 직접 개발한 Lenti-Con^TM Reagent (Cat No: LGV-1021)과 HIV-Safe^TMManager (Cat No: LGV-1022)를 적용제작하므로제공된 바이러스들이 5회 이상의 반복된 Freeze-thaw step에도 심각한 감염활성의 감소없이 안정하게 사용할 수 있는 장점이 있으며 일반적으로 PBS나 physiological buffer 등에 녹여 제공되는 타사 제품들과는 다른 차별화된 제품을 제공합니다.

▷렌티바이러스 제품군은 제 2등급 LMO에 해당되는 제품으로 해외 유사 바이러스 제조기업을 통한서비스 요청 시 반드시 국내 시험×연구용 LMO 정보시스템에 LMO 수입신고 절차 (대략 2 ~ 4주)를 거치셔야만 합니다.하지만 국내 기업인 ㈜루젠에스씨아이를 이용하실 경우 상기 절차가 필요치 않으며 해당기관이 제 2등급 LMO 연구시설로 신고만 되어 있으시다면 해외위탁제조서비스를 이용하시는 것보다 더절약된 시간 내에 제품을 공급 받으실 수 있습니다.

▷㈜루젠에스씨아이에는 렌티바이러스 및 관련 제품군 제조경력 10년 이상의 전문 연구인력들을 보유하고 있어서 최소한의 정보 제공만으로도 원하시는 형태로의 벡터 제조부터 바이러스 생산 및 형질전환 세포주 생산까지 요청에 따라 one-step으로 서비스 진행이 가능합니다.

2.루젠렌티서비스의 진행 프로세스는 어떻게 되나요?

▷유저 벡터 회수 및 QC:유저분들의 벡터는 두 가지 방법으로 회수 가능합니다.첫번째 직접 저희 ㈜루젠에스씨아이(홈페이지 내 주소 참조)로 냉장택배를 통해 보내주시는 방법 (착불이용, DNA 농도는 100 ng/ul, 10 ul 정도)과 수도권 내 위치한 기관의 경우 저희 영업부 직원이 직접 방문하여 회수 가능합니다. 회수된 벡터는 자체 QC를 거친 후 통과되면 렌티바이러스 제조에 맞는 quality로 다시 생산됩니다.

▷렌티바이러스packaging:렌티바이러스 생산 세포주로서HEK-293T, 293FT 또는 LX-293T 세포들이 적절하게 이용되고 있으며 생산되는 렌티바이러스는 우선적으로 3세대 VSV-G Pseudo-type 바이러스지만 요청하신 벡터 특성상 생산 yield가 매우 낮을 경우에는 2세대 VSV-G Pseudo-type 바이러스로 생산 및 제공 가능합니다.

▷렌티바이러스 농축 및 정제:원칙적으로 In vitro grade 경우는 Lenti-Con^TM Reagent로 농축 후, HIV-Safe^TMManager에 resuspending되어 발송되며 in vivo grade 경우는 고속원심분리 농축 후, DPBS 또는 HIV-Safe^TMManager에 resuspending되어 발송됩니다.하지만 유저 요청 시 in vitro grade의 경우도 고속원심분리 농축 후 제품제공이 가능합니다.

3.루젠렌티바이러스의 바이러스 역가는 어떻게 결정하여 제공되나요?

▷ ㈜루젠에스씨아이의 모든 렌티바이러스 제품의 역가 결정은 바이러스의 genome을 직접적으로 측정하는 RT-qPCR 방식 (Commercial RT-qPCR detection kit 사용)을 채택하고 있습니다.대부분의 바이러스 제조업체가 렌티바이러스의p24를 검출하는 ELISA 방식을 채택하고 있지만 이 방법은 실제로 바이러스 제조과정에서 생산되는 genome-free particle까지 검출함으로써 실제 viral genome이 포함된 활성이 있는 바이러스 농도보다 더 과량으로 검출되는 단점이 있습니다.그러나 ㈜루젠에스씨아이렌티바이러스는viral genome을 직접적으로 측정하여 역가를 산출한 제품으로 연구자들에게 일관성 있는 실험결과 도출에 용이합니다.

▷ 유저 요청 시 p24 ELISA 방식으로 바이러스 역가측정 후 제품 제공이 가능합니다.

▷ RT-qPCR 산출 바이러스 역가 단위 =IFU/ml (MOI 산출 시 TU/ml과 동일하게 적용함)

4. 제품은 항상 보장된 바이러스 titer로 제공되나요?

▷㈜루젠에스씨아이의 재조합 렌티바이러스는0.5 ~ 1.0 x 10^8 IFU/ml의 바이러스 역가범위의 제품을 제공해 드리고 있습니다.물론 한 batch 생산 yield가 높게 나온다면 보장된 역가 이상의 바이러스를 제공해 드립니다.

▷ 또한,바이러스 생산 yield가 기준치 이하로 제조될 경우 최소 3 batch까지 생산된 바이러스를 합친 후 제공하는 방식으로 유저분들에게 최대한 많은 양의 바이러스를 공급해 드리고자 노력하고 있습니다.

▷ 하지만 하기의 경우중 한 가지에 해당된다면 위에 명시된 바이러스 titer는 보장되지 않습니다.

• 렌티바이러스 벡터로 도입된insert 길이가 4 kb 이상인 경우
• Insert가 바이러스packaging에 영향을 주는 유전자인 경우
• 바이러스packaging세포에 insert가 독성을 유발하는 경우
• Secondary structure 유발서열 및그 외 알려지지 않은 메커니즘에 의해 바이러스packaging에 부정적인 영향을 유발하는 서열인 경우
• 유저 제공 plasmid내 바이러스packaging관련 주요인자가 결여된 경우