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[실전 실험 프로토콜 101] #17. Colony formation assay (콜로니 생성 분석)
Bio통신원(세오)
Colony formation assay (콜로니 생성 분석)은 단일 세포가 생존하고 번식하여 colonies (군체)를 생성하는 능력을 측정합니다. 이 분석은 암세포 생존과 성장에 대한 방사선의 영향을 연구하는 데 사용되었고, 오늘까지 방사선 생물학 (radiobiology)에서 필수적인 역할을 했습니다. 처음에는 방사선 생물학 분야에서 사용되었지만, 암 연구에서 세포 성장과 잠재적인 임상 응용을 가진 다양한 물질의 세포독성 (cytotoxic) 혹은 유전독성 (genotoxic) 효과를 평가하기 위한 표준 방법이 되었습니다.
클론 생성성 (clonogenicity)을 측정하기 위해서는 세포가 고립된 군체가 생성될 수 있도록 세포를 매우 낮은 밀도로 균일하게 깔고, 군집이 생성되기 위해 기다려야 합니다. 그다음으로, 콜로니를 고정 (fix) 하고, 염색하여 눈에 보이게 만들어서, 콜로니를 계수합니다.
그림 1. 클론 생성 프로토콜 [출처 1].
실험 방법
그림 2. 콜로니 계수 및 세포 생존 곡선 [출처 1].
노트
출처
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논문에 나온 실험을 따라서 하고 싶어도 논문에 실험 절차가 너무 간략하게 소개되어 있거나, 자세한 설명이 없어서 실험을 따라 하기가 어려운 경우가 종종 있습니다. 이럴 경우 '같은 실험실 혹은 주위 실험실에서 실제로 유사한 실험을 한 사람의 실험 노트가 있다면 얼마나 좋을까?' 라고 자주 생각했습니다. 이번 연재를 통해 제가 실험실에서 배운 내용을 같거나 비슷한 분야에서 연구하는 분들과 나누고자 합니다. 물론 제가 소개하는 내용이 최고라고 생각하지 않고, 소개하는 내용보다 더 좋은 실험 방법이 있다고 생각합니다. 이러한 자신만이 알고 있는 실험 방법을 공유하여 주시면, 같은 길을 걷고 있는 분들에게 도움이 되리라 생각합니다.
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