안녕하세요?

최근 DCFDA 시약을 이용하여 H2O2와 약물을 처리하고 ROS를 보는 실험을 진행중입니다. 그런에 H2O2를 1mM, 1.5mM 로 4시간을 처리했음에도 불구하고 control과 차이가 없거나 오히려 낮은 형광 값이 나타납니다.

측정은 Tecan plate reader를 형광 파장에 맞추서 사용합니다. bottom reading이 안되는 제품이라서 top reading에서 Z값 스캔 후 진행하기도 해봤고 cell lysis 시켜 solution 상태에서 top reading으로 측정도 해보았습니다. plate는 당연히 falcon 96 well black clear bottom plate를 사용했구요. lysis 전이나 후나 결과의 양상이 비슷합니다.

간혹 plate reader를 사용하면 잘 되지 않아 Facs를 추천하는 글을 많이 보게 되는데 저희는 어떻게든 plate reader로 측정해내야 하는 상황입니다. 

경험이 있으신 연구자 분의 조언을 구합니다.

댓글도 감사하고 nanniceguy@hotmail.com으로 연락처 남겨주시면 더욱 감사하겠습니다.