mouse whole brain을 '4% PFA -> 15% sucrose -> 30% sucrose'

후 OCT 하여 -80'c에 보관하였습니다.

이제 cryosection(24um)하여 슬라이드에 붙인 후 IHC-IF를 진행하려고 하는데..

하여야 하는 IHC antibody 종류가 많다보니, 

section 후에 slide 상태로 보관 후에 IHC를 진행하려고 합니다.

질문은 다음과 같습니다.

(1)아래와 같이 진행해도 괜찮을까요? 어떤 분은 slide에 올린 뒤 그냥 바로 -80'c에 넣어도 된다고 하시고,,, 조언부탁드립니다.

1) 자른 section을 slide에 올리기

2) PBS wash (5min X3)

3) Cold acetone (10min Fixation) -> 다 증발하면, deep freezer 보관

(2)보관 후 brain 붙은 slide 사용할때, 아래와 같이 사용하면 될까요..?

#RT에 놔두고 온도 안정화 à PBS wash (5min X3) è PAP PEN è 4%PFA로 고정 

(3)딥프리져에 slide 보관 후, 이후에 다시 사용할때  60도 dry oven에서 1시간 baking하고 사용하는 것이 좋다고 하는데.. 이것에 대한 의견도 궁금합니다.

바쁘신 시간 내어 글 읽어주셔서 감사합니다.