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| Q. 균 stock 만들기 |
| 20%가 되게 넣고 -80도씨에 얼린다
이방법이 맞나요??
또 e.coli와 staphylococcus 두가지를 키울것인데 동일하게 stock을 만들면 되나요??
그리고 둘다 키우는것은 37도씨 하루정도면 사용할수 있을정도로 ... |
| A. 저라면 구입한 균을 액체 배지에 우선 활성화를 시킨뒤
스트레킹하여 순수콜로니를 다시 액체배지에 키워 스탁하는 방법을 쓸것 입니다.
구입한 균을 바로 스트레킹하는 방법은 추천해드리고 싶지 ... |
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답변 2 | 2017.03.03 |
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| Q. transfection이 안되요.. |
| 너무 답답하여 질문 올립니다...
protein interaction을 연구하는지라..transfection을 주로 하여 실험을 했었는데
그동안 5~6년을 다카라 calphos transfection kit를 사용하였는데..
갑자기 어느순간 전혀 transfection이 ... |
| A. 음.. 저는 FUGEN를 사용합니다. 경험상 lipogectamin 보다는 잘 되더라구요.. |
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답변 3 | 2014.02.19 |
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| Q. E.coli culture |
| 아니면 실험 step에서 잘못된 것인지 궁금합니다.
그리고 E.coli 배양시 항생제는 넣어주지 않는것인가요? plate는 Mackonkey plate 사용하고 있습니다. 처음 배양하는것이라 초보적인 질문이 많은 점 이해 ... |
| A.
그러므로 counting이 아니라 OD값으로 측정을 하는 것이구요
E.coli배양시 항생제를 넣어 주는 이유는
본인이 원하는 vector를 transformation한 후에 vector을 먹은 E.oli를 키우기 위해 selection marker를 넣어 주는 ... |
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답변 1 | 2014.08.13 |
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| Q. Cell 배양 시 E.coli 감염여부 검사 |
| 방법으로 확인이 가능한 가요? 육안으로 확인했을 때 E.coli인듯하나 어디까지나 심증이고 정확한 결과를 확인하고 싶습니다.
2. 또는 감염된 배지를 통해 어떤 종류의 박테리아인지 확인할 수 있는 ... |
| A. 배지의 bacterial contamination에 대해서 mycoplasma를 제외한 다른 종류의 bacteria를 탐침하기 위한 방법을 정확하게 모르겠습니다.
그런 kit를 판매하는지도 모르겠습니다만,
일반적으로 배지에 냄새가 나고 ... |
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답변 2 | 2017.02.23 |
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| Q. e.coli strain |
| F-, mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC) Φ80lacZΔM15 ΔlacX74 deoR recA1 araD139
Δ(ara-leu)7697 galU galK rpsL endA1 nupG
이게 TOP10 cell의 genotype이라고 하는데요
무슨 말인지 잘 모르겠어요 책에도 찾기힘드네요;;
답변 부탁드립니다. |
| A. 균주 판매하는 카다로그를 보시면 각 유전자에 대한 설명들이 나옵니다. stratagen , NEB 등의 카다로그를 찾아보세요.
예로 rpsL은 Streptomycin resistant gene 이고 recA 는 recombination 관련유전자이고 Δ표시는 유 ... |
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답변 2 | 2007.12.27 |
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| Q. E.coli gene deletion 그리고 pKD46 |
| 따뜻하고 알찬 조언 부탁드립니다.^^
p.s pKD46또는 E.coli gene deletion material 분양가능하신분 쪽지 부탁드려요 ... |
| A. Red recombinase가 없으면 deletion이 안 일어납니다. 있어도 E. coli strain에 따라서 효율이 크게 달라집니다. 예를들어 BL21은 TOP10과 같은 K12에 비해 효율이 1/10정도밖에 안 됩니다. (colony 개수 기준)
gene bridge라 ... |
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답변 2 | 2012.06.28 |
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| Q. macconkey배지와 e.coli에 대해서 질문드려요! |
| 어떤 탄소원보다 젖당을 먼저 사용해야 말이되요)
두번째 E.coli는 젖당발효를 해도 enterobacter처럼 산성물질을 안내보낼것이다.
(이게 맞으려면 구글에 나온 핑크색 대장균 콜로니들은 뭔가요ㅠㅠ) ... |
| A. 맥콩키에는 일차 탄소원이 lactose입니다.
E. coli는 반드시 맥콩키에서 핑크색 콜로니가 나와야 합니다.
그러나 예외는 있습니다.
실험실에서 사용하는 E. coli DH5a 등의 균주는 lactose mutant라서 맥콩키에서 ... |
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답변 3 | 2015.04.06 |
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| Q. 고체 배지에 배양된 E.coli를 이용한 Miniprep |
| colony를 액체 배지에 넣어야 하는지 알고 싶습니다
3) E.coli 10ml가 배송된 그 상태로 바로 miniprep을 진행해도 괜찮나요 ... |
| A. 1) 네 해야합니다.
2) 37도 200 rpm에서 15시간정도면 충분히 자랍니다. colony는 살균한 팁으로 콕 찍은다음 액체배지에서 pipetting해주면 잘 풀립니다.
3) E coli가 없어서 주문하신건가요? 왜 주문하신지는 모 ... |
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답변 1 | 2021.05.20 |
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| Q. 16s rRNA gene을 target으로 primer를 제작하고자 할때 E.coli 기준? |
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어떤 E.coli던지 무관한건가요? 그냥 생각하기에는 E.coli들 마다
16s rRNA gene sequence가 조금씩 다를 것 같은데요
sequence alignment program에 넣을때 이 number를 넣어야 되는데
혹시 아시는분 있으신가요? 어디서 ... |
| A. 모든 E. coli의 16S rRNA의 seq는 같습니다.
E. coli가 아닌 다른 세균의 경우에도 16S rRNA를 위한 universal primer가 있습니다.
여기서 검색해보세요.
전체 16SS rRNA seq, V3 region primer등 다양한 primer seq를 찾을 수 있 ... |
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답변 2 | 2007.12.16 |
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