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| Q. 96well에서 PBS washing 후 cell이 떨어지는 것 같습니다 |
| 간단히 설명드리자면 seeding->DCFH-DA treat(30min)->1X PBS washing -> 물질 Treat -> 형광도측정 이고, phenol free 배지 사용합니다.
고민은 다름이 아니라 결과가 나오지 않는 이유 중 하나가 제 생각에는 pbs washing시에 ... |
| A. 해당 셀이 뭔지 잘 모르는 관계로 정확한 답변일 수는 없으나 cell이 정상적으로 붙어 있고 접착력이 약한 셀이라는 가정 하에 답변해 볼게요. (애시당초 붙지 안는 cell을 사용하셨다면 안됩니다... 붙 ... |
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답변 6 | 2019.05.20 |
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| Q. media 교체 시 PBS washing |
| 교체 시에 항상 10mL DPBS로 ~10초 동안 washing해주고 있었는데 이게 ... 까요? 다른 글들 보니까 PBS washing 시 cell이 잘 부착이 안 된다는 말을 봐서요..
그리고 이번에 너무 양이 적어서 cell flask를 T-75에서 T-2 ... |
| A. 처리한다던가 하는 방식으로 처리하시구요. 일반적으로 PBS에 의한 영향보다 trypsin과 같은 detachment solution에 의해 영향을 더 받습니다 ... |
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답변 3 | 2020.06.03 |
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| Q. PBS washing을 하면 세포가 많이 죽습니다 ㅠㅠ |
| seeding해서 drug을 친다음 PBS로 washing하고 몇시간동안 ... 있는데 이 과정에서 PBS로 washing을 하면 세포가 반이상은 죽어있습니다 실험이 불가능할 정도로... culture중인 세포라 실험전에 PBS를 water bath에 ... |
| A. 처리한 후 반응시간이 길어지면 PBS가 아닌, serum free media나, 문제가 없다면 serum 포함 media, ... 한다. 세포 배지에는 Ca2+ 이온이 포함되어 있지만, PBS에는 포함되어 있지 않다. 약물을 처리하기 전에 PBS로 ... |
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답변 4 | 2019.07.11 |
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| Q. PBS washing 후 cell들이 이상해져요 ㅜ.ㅜ |
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또 한가지 이상한 점을 오늘 발견했는데요.. pbs로 washing 후 세포를 현미경으로 보니
세포 형태만 희미하게 남아 있고 안에 내용물들(소기관들)은 거의 없네요.. ㅜ.ㅜ
이런 경우는 처음이라 좀 ... |
| A. 저의 경험담을 말씀드려 보면..
제가 실수로 물을 PBS로 생각하고 washing을 한 적이 있었는데...
삼투압 때문인지 셀들이 다 터져버리더군요..
PBS가 제대로 된 것인지 한 번 확인해보는 것이 어떨까요 ... |
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답변 1 | 2004.08.16 |
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| Q. PBS washing 시 cell이 최대한 안 떨어지게 하는 방법이 무엇일까요? |
| 실험을 진행중인데, 형광도를 찍기 전에 PBS washing 과정이 2~3번정도 있습니다.
그런데 형광도를 찍어보면 늘 형광도가 너무 낮게 나오는데 (200~500대이고, 편차가 너무 큽니다. 같은 group인데 200~2000까지 ... |
| A. 아마도 워싱 문제가 아닌것 같긴 하지만..
저있던 랩실에서는 2/3 정도 석션 후.
킴스와이프 몇장 두껍게 깔아놓고
그위에 플레이트를 뒤집어서 잠시 뒀습니다.
교수님 실험하실때 어깨너머로 배운거 ... |
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답변 6 | 2019.12.12 |
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| Q. Immunofluorescence의 washing에서 PBS-T? |
| 경우에는 PBS-T를 사용하지 말고
PBS로만 진행하라고 배웠는데요. CD86과 같은 Cluster of differentiation marker는 그럼 PBS로만
washing 해야 하는건가요? 결과에 background가 많이 나오는 것 같아서 gain값과 offset 값을 ... |
| A. 아닐 겁니다. 아마 Cell Permeablization을 안해서 PBS-T를 쓰지 마라고 한 걸 겁니다. Membrane Receptor는 ... 잡으니까요. 그런데 이미 Permeablization 한 상태라면 PBS-T를 써도 상관없습니다. PBS와 PBS-T의 차이는 T ... |
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답변 1 | 2018.02.14 |
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| Q. homogenizer washing할때 PBS와 3DW 차이? |
| homogenizer를 어떤 선배님은 3DW로 washing하라하고, 어떤 분은 RNA니까 PBS로 washing해야한다는데, PBS는 1DW로 dilution해서 만드는건데 무슨 차이인가요 ... |
| A. 기계를 워싱하는데 PBS를 사용할 이유는 전혀 없습니다.
물을 사용하세요. |
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답변 1 | 2016.02.07 |
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| Q. [Urgent PLZ...] cell culture 용 PBS 잘못구매한거 같은데... |
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(DPBS는 한병 있습니다..)
제가 PBS를 사용하려는 곳은,
1. Antibiotics를 넣은 PBS 버퍼 -> 조직을 떼어와서 washing할때 사용
2. Trypsin 처리 하기 직전에 Medium 씻어낼때
3. FCS 를 넣은 PBS 버퍼 -> trypsin 작용을 ... |
| A. 저희는 Gibco 제품 21600-010를 cell water에 섞어서
사용하고 있습니다.. 가루거든여..
이게 불편하시다면.. 이가루를 녹여서 파는 제품을 쓰셔도 될듯.. |
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답변 5 | 2007.07.25 |
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| Q. PBS구입 관련 질문합니다. |
| 처음에 washing목적으로 사용했던 PBS는
Thermo 회사제품입니다.
이번에 재고가 없어서
제넷바이오(Genet Bio) 제품을 사용하고자 하는데
혹시 사용해도 괜찮나요???
washing용으로만 사용할려고 하는데 중간에 ... |
| A. washing목적이 어떤 워시에 목적인지 어떤 실험인지도 안적어놓으셔서 다른분들도 코멘트 어려울것같은데요 |
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답변 2 | 2015.07.30 |
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| Q. 세균이 pbs에서도 살아있을수 있나요? |
| 실험을할때 세균을 PBS로 washing 한 후 PBS로 다시 채워 ... 1h정도 반응을 보는데 pbs에 washing 한 균을 이용하면
세균이 영양분이 없으니 다 죽지않을까요?
그럼 혈청에 의해서 균이 죽은건지 영양분이 ... |
| A. 자연계 어디에서나 살 수는 없습니다.
세균을 PBS에 washing하는 것은 배지나 실험에 방해를 주는 물질을 씻어주는 목적이고
균 종마다 그리고 보관 온도마다 생존기간은 각각 차이가 납니다.
무 포자 ... |
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답변 5 | 2018.12.04 |
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