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정확도순 ㅣ 날짜순
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| Q. Real time PCR 과 일반 PCR |
| 이제 PCR을 시작하는 초보입니다.
세포를 lysis 하여 RNA를 뽑은후 cDNA로 합성하여
Real time PCR을 했습니다. primer는 GAPDH, A, B 라는 gene 으로 하였을때
GAPDH와 ... 뜨지 않고 A라는 gene이 많이 발현되었습니다. ... |
| A. 답변 감사드립니다.
두 가지 다 고려해서 다시 해 보겠습니다
감사합니다^^ |
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답변 3 | 2009.08.05 |
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Q. PCR 결과 두리뭉실한 밴드의 정체는? |  첨부파일 |
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항상 이 게시판에서 많은 도움을 얻고 있습니다.
PCR을 처음 하고 있는데, 도통 알 수 없는 결과들이...
첨부한 사진 중 레인이 많은 ... 하겠습니다.
rat brain의 total RNA 를 뽑아서 RT를 한 후, actin primer를 ... |
| A. 첨부파일 |
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답변 2 | 2006.02.02 |
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| Q. pcr에서 원하는 밴드는 않나오고 아주 맨밑작은 밴드만 나오네요 ㅜㅜ |
| pcr에서 원하는 밴드는 않나오고 아주 맨밑작은 밴드만 나오네요
제가 약 42kD 정도의 단백질을 프라이머를 제작해서 PCR을 했는데욤,,
나중에 최종적으로 확인해보니,,,
사이즈 마커 맨밑에부분에만 ... |
| A. 42kDa의 단백질을 PCR하신 건 아니겠죠? 그럼 당연히 PCR이 안되고 primer 밴드만 제일 아래 희미하게 보이죠..
물론 그게 아니시라면...
PCR 후 원하는 사이즈에 밴드가 나오지 않고 gel의 제일 아래쪽에 ... |
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답변 2 | 2006.10.06 |
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| Q. 정량PCR 대행해주시는 곳~ |
| taqman을 이용하던, 다른 방법을 이용하던..
발현 DNA를 정량하려고 하는데.. 정량 PCR을 해주시는 곳 있나요? |
| A. 다른 방법을 이용하던..
발현 DNA를 정량하려고 하는데.. 정량 PCR을 해주시는 곳 있나요?
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안녕하세요
충남대학교 공동실험실습관 real time PCR 담당 연구원입니다. ... |
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답변 2 | 2005.04.21 |
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| Q. 일반 PCR에 대해서... |
| 일반 PCR로 발현양을 비교하고 있습니다만...실제로 정량적인 방법이 아니므로 양을 ... 비율을 비교하고 있습니다. 예를 들어 26,27,28,29,30 싸이클이 될때마다 PCR기계의 뚜껑을 열어 해당 싸이클에서의 ... |
| A. ..암울한 현실입니다... PCR 기계가 많으면 동일하게 하면 되는데 그렇지도 못하고... ... 생각밖에 안들었습니다...
그래서 생각을 한게... 저희는 PCR 기계가 두개 있거든요... 그래서 extension 이 끝나고 post ... |
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답변 7 | 2007.02.12 |
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| Q. Real time PCR 에 사용할 primer 제작 |
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저는 처음으로 real time PCR에 사용할 primer를 제작하려는 연구원 입니다.
전에는 이미 제작되어있던 primer로 RT-PCR을 시행해본 경험이 있는데,
이번엔 전과 다른 gene 의 expression 을 ... 특성에 맞게 200bp ... |
| A. time PCR을 위해 저도 primer를 손으로 직접 짜본적도 있고, 프로그램을 이용한 적도 ...
200bp만 되더라도 non-specific과 결합할 가능성이 높아지게 됩니다..
그래야 pcr denature, annealing, extention시간을 짧게 줄 ... |
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답변 2 | 2008.01.22 |
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| Q. quantitative PCR .... |
| 안녕하세요, 실험초보 학부생입니다.
quantitative PCR 이라 하면.. real time PCR을 하면 되는거죠? |
| A. 일반적으로 qPCR은 Real-Time PCR을 지칭합니다. |
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답변 1 | 2008.07.21 |
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| Q. PCR 결과좀 봐주세요 | 첨부파일 |
| 주형으로 PCR을 진행했습니다.
30cycle을 진행했구요
94--30초
annealing time--45초
72--30초로 했습니다.
gel의 well은 가장 작은것을 이용했구요 loading양은 5ul로 했습니다.
multi-channel로 건 쪽에서는 끌리는 것도 ... |
| A. 일단 annealing온도를 높여보는 것도 문제를 푸는 하나의 방법이기는 합니다.
하지만 그 이외의 다른 여러 요소들도 고려를 하셔야합니다.
프라이머의 농도, extension시간, cycle 수
이런것들을 변경해보아 ... |
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답변 4 | 2008.10.07 |
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| Q. PCR후 문제발생 |
| Genomic DNA를 뽑아낸 뒤 TE buffer와 섞어서 PCR에 사용했거든요.
근데 제가 PCR을 할 영역은 3kb정도이고 Primer도 그렇게 맞춰서 짰는데요.
도대체 뭐가 잘못된건지 PCR product를 전기영동해 보았을때,
5kb정도의 ... |
| A. 어떤 cell의 gDNA를 PCR에 사용하셨나요? |
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답변 3 | 2009.02.18 |
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| Q. RT-PCR 질문입니다. | 첨부파일 |
| 3개 한set sample로
4가지 유전자와 b2-microglobulin에 대해 RT-PCR을 했습니다.
b2-microglobulin은 제가 논문에서 primer와 PCR조건을 그대로 따라했고
나머지는 그냥 b2-microglobulin과 같은 조건으로 PCR했습니다. ... |
| A. 감사합니다.
template는 같습니다...
그렇다면 조건 잡을때 이런 경우는 annealing temperature만 바꿔서
해보면 될까요? |
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답변 3 | 2009.04.27 |
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