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| ⓘ 'Western' 관련 검색광고입니다. |
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Westetn blot (WB) imaging system |
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정확도순 ㅣ 날짜순
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| Q. westernblot 실험시 전기영동 관련 질문 |
| 안녕하세요. 선배님들~
저는 지금 석사 2학기에 접어든 대학원생입니다.
westernblot 실험을 하면서 궁금한 점이 ... 암페어) 단위로 맞추는게 맞는 것인지도 궁금합니다...
westernblot 고수님들의 도움 ... |
| A. 암페어 를 constant로 설정하는 경우 gel 1판당 암페를 설정해 주시는게 맞습니다.
그리고, volatage 를 constant로 설정하시는 경우 gel 갯수 상관 없이 동일 voltage로 내리시면 됩니다.
시간은 보통 dye가 빠지 ... |
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답변 1 | 2016.09.05 |
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| Q. secretion protein 측정시 ELISA 와 westernblot 의 차이점 |
| level 이 어느정도냐에 따라서 secretion 되어지기 때문에 westernblot 결과와 ELISA의 결과가 어느정도 유의성이 맞아야 하는건 아닌가요?
혼자서 머리 쥐어짜면서 고민은 하는데 별 소득은 없고해서 답답한 ... |
| A. 다른건 모르겠고 발현정도와 secretion 정도에 대해서만 말씀드리죠
발현정도와 secretion 정도는 당연히 틀릴수 있습니다
단백질의 발현은 cytosol에서 만들어져서 ER-> Golgi등을 통해서 원하는 위치에가서 ... |
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답변 3 | 2008.06.13 |
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| Q. westernblot 결과 문제 |
| westernblot에 대해 궁금한 점이 있어 질문올립니다..
1. transfer한 후 ponceau로 membrane을 염색해서 band를 확인하는데...
band가 뚜렷이 보이지 않고 band사이에 하얗게 세로줄이 있어요~~
무슨 불순물이 끌고 ... |
| A. band 사이에 하얗게 줄이 생기는건 단백질이 고르게 내려오지 않은게 아니라 transfer할때 문제가 있어서 나타난 것으로 생각됩니다. 그리고 ECL이 지저분하게 나올때도 있고 안나올때도 있는건 저같은경 ... |
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답변 5 | 2007.03.10 |
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| Q. westernblot의 transfer에서, gel을 뒤집어 넣어도 될까요? |
| westernblot에서 SDS-PAGE를 끝내고, transfer로 옮기는 과정에서
평소와 다르게 gel이 반대편 유리판에 붙어버려서, 다시 반대편으로 옮기면 gel이 잘못될 것 같아
그대로 membrane을 올리고 transfer를 ... |
| A. X-ray film의 좌우만 바뀌므로 상관 없습니다. |
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답변 1 | 2018.07.13 |
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Q. WesternBlot 젤 흔들림 오류 해결방법을 알려주세요 |  첨부파일 |
| 안녕하세요 WesternBlot으로 실험을 하는 학생입니다.
제가 10%,12% gel을 만들때는 괜찮은데
항상 8% gel을 만들때면 윗부분이 꺾이거나 휘어지는 현상이 발생합니다.
굳히는 시간도 늘려보고, 위에 DW도 ... |
| A. 저도 Transfer가 가장 의심스러워서 교수님도 제가 하는 거 직접 보셨는데 그 과정에는 문제가 없다고 하셨는데
혹시 stacking gel 덜 자르면 저렇게 되나요?? |
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답변 3 | 2021.03.19 |
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| Q. Westernblot Transfer 할 때 ice pack... |
| Westernblot Transfer, BIORAD 제품 사용하고 있습니다.
Transfer를 할 때 buffer가 뜨거워지지 말라고 ice pack(하단 이미지 왼쪽 끝)을
http://www.biorad.com/cmc_upload/Products/-9281/mini_transblot.jpg
넣어 주는데 이 pack 가운데 ... |
| A. 예전에는 오른쪽 통을 스티로폼에 담아 얼음을 채워서 사용했습니다.
급하게 사용하시려면 이런 방법도 있다 알아두시면 될 것 같네요.
그리고 저 아이스팩이 transfer 카세트에 딱 맞는 것을 제외하면 ... |
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답변 2 | 2021.11.24 |
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| Q. westernblot saple을 준비하던 중 궁금한 것이 있어 질문드립니다. |
| westernblot saple을 준비하던 중 궁금한 것이 있어 질문드립니다.
mouse tissue (spleen, liver, brain 등)에서 lysate를 만들어 쓰려고 하는데
lysis buffer로 RIPA buffer를 많이 쓰시더라구요..
Sodium Chloride ---------------- 150 ... |
| A. inhibitor cocktail 은 사용하시는 회사 제품에 working concentration이 나와있을거에요 브레인에 특화되게 사용하는 버퍼가 있는지는 모르겠습니다. 예전에 조직을 깰 때 모두 같은 버퍼를 썼던 기억이 있네요 |
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답변 1 | 2011.04.13 |
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| Q. westernblot 질문입니다. | 첨부파일 |
| eNOS 의 phosphorylation form (thr/ ser) 를 westernblot으로 확인하는 실험을 하고 있습니다. 그런데 total ... 나오는 이유가 무엇인지 궁금합니다.
또 eNOS phospho form 을 westernblot 해보신분들의 조언 부탁드립니다 ... |
| A. 예전엔 나왔다가 요즘들어 안나온다고 한다면,
혹시 오래된 antibody 문제가 아닐까요?... |
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답변 4 | 2007.01.23 |
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| Q. westernblot에서 anti body |
| westernblot에서 anti body부칠때요
가령 Primary GST-Momo이면 2nd 도 mono처리해야 되죠?
Primary,secondary를 poly쓴다면 MONO와 차이점은요?
또 1st는 mono쓰고 2nd는 poly쓴다거나 이렇게 섞어서 쓰면 안되는지요? |
| A. 공부하세요~^^
농담입니다.
개념 혼동이 있으신듯...
Mono, poly는 antibody가 monovalent인지 아니면 여러 antibody가 섞여있는지를 나타낸 것일뿐 primary, secondary antibody를 쓰는데에는 아무 상관도 없는겁니다. |
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답변 5 | 2006.07.06 |
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| Q. westernblot 할때 Ab로 단백질 detection 이해가 안되요..ㅠㅠ |
| 안녕하세요~
석사생활 시작한지 2달 되는 초짜대학원생입니다..ㅠㅠ
저희 실험실에서는 cell 에 GFP를 transfection 시켜서 IP 를 하고 western 을
하는데요. IP 에서 GFP Ab 쳐서 bead 붙여서 가라앉히는 것은 이 ... |
| A. GFP와 SUMO의 관계가 아니라 GFP에 붙어 있는 어떤 단백질과 SUMO의 관계일 겁니다.
이를 가령 A라 했을때 GFP-A가 SUMO와 결합을 한다면 세포내에서 GFP-A/SUMO는 complex를 이룰 것이고 여기에 GFP antibody를 사용하 ... |
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답변 4 | 2008.02.27 |
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