|
|
|
| 55건 |
정확도순 ㅣ 날짜순
|
| Q. Yeast Lysis |
| 추출하려고 합니다.
그런데, protocol에서 Lyticase나 Zymolase가 Lysis를 위해 필요하다고 하는데 저희 실험실에는 없어서요ㅠㅠ 혹시 대체 할 수 있는게 있을까요?
논문을 찾다보니 Lysozyme에 다른 계면활성제 ... |
| A. - yeast cell wall은 Lyticase or Zymolase가 필요합니다.
- lysozyme : bacteria peptidoglycan lysis
- Tween, SDS : cell membrane lysis |
|
답변 2 | 2022.09.14 |
|
| Q. yeast의 cell lysis |
| 있습니다.
균주들을 선택해서 발효도 진행중인데 좀처럼 cell lysis를 어떻게 해야되는지를 모르겠네요
bacteria는 boiling만 해도 쉽게 되는데
몇몇 방법을 써봤지만 전혀...
보통 어떤 방법들을 통상적으로 ... |
| A. 주로 sonication을 이용합니다만, 단순히 전기영동할 목적이라면 sample buffer에 넣고 끓이는 것만으로도 cell은 다 깨집니다. SDS가 들어가 있고 100C에서 끓이는 조건에서 깨지지 않는 미생물은 없습니다. |
|
답변 2 | 2012.11.29 |
|
Q. Freeze Thaw Vs Glass Beads (Yeast cell lysis) |  첨부파일 |
|
두가지방법으로 yeast cell lysis를 진행시키고
모은 protein들을 샘플로, SDS-PAGE gel 을 이용하여 eletrophoresis 를 진행하였습니다.
(왼쪽sample:freeze thaw 가운데: STANDARD 오른쪾샘플: glass beads)
질문
1) Freeze Thaw Vs ... |
| A. 별개 아닌가요?
DNA prep. 방법이라면
예전에 저는 lysis buffer (아마 소량의 SDS가 포함됐던 걸로 ...
물론 phenol extraction으로 정제 했었구요.
동량의 yeast cell을 썼다고 해도 뽑힐 수 있는 DNA양은 다를 수 ... |
|
답변 2 | 2013.11.28 |
|
| Q. DNA isolation from Yeast | 첨부파일 |
| 것입니다.
Yeast>
1. 1.5ml micro tube에 1.5ml 씩 분주.
2 ... 의해 pellet을 suspension.
4. Yeast lysis solution 200ul 첨가.
5. phenol/chloroform/Isoacyl alcohol(25:24:1) 200ul과 acid washed glass bead 0.25~0.3g 첨가.
6. 2min 동안 ... |
| A. 혹시 elution 뭘로 하셨나요?
RNA 일 수도 있을꺼 같은데요, 없애려면 elution buffer에 RNase를 첨가해주면되는데..
그리고 위대로 prep.하면 genomic DNA랑 plasmid랑 같이 나오는건 알고 계시죠? |
|
답변 1 | 2011.02.23 |
|
| Q. Yeast colony PCR 질문입니다. |
| 이스트는 손에 잘 안익네요
혹시 sonication 등으로 lysis시킨뒤 PCR 하면 잘 안될까요? 단순히 벡터 ... transformant가 많아 손대질 못하고 있습니다.
혹시 Yeast colony PCR 이 확실히 잘 되는 방법 알 수 있을까요 ... |
| A. 저도 고생하다가 조건을 잡아서 잘나온 protocol 인데
boiling 만으로는 결과가 재현이 안되더라구요
pellet(약 400 ul midia, spin down) 을 0.02 M NaOH 100 ul에 vortexing 하여 부유 시킨후
90 도, 10 분간 boiling , 상온에 ... |
|
답변 2 | 2009.11.10 |
|
| Q. 스피드님! yeast gDNA만을 transformation 한것은 아닙니다. |
| yeast gDNA만을 transformation 한것은 아닙니다.
yeast에서는 plasmid prep.이 잘 안되서 전체 DNA를 분리한 후(lysis buffer+bead로 DNA를 분리하면 shuttle vector가 포함되어 있겠지요.) E.coli에 transformation 한다고 ... |
| A.
일반적인 plasmid prep. 과정과 동일하게 하면되고 cell lysis과정에서 lyticase나
zymorase를 사용하여 cell wall을 파쇄하여 사용하시면 됩니다 ... |
|
답변 3 | 2009.01.16 |
|
| Q. yeast cell lysis |
| yeast cell을 이용하여 recombinant protein을 발현시킨 후
homogenizer을 이용해 lysis을 했습니다.
문제는 lysis후 centrifugation을 하면 cell debris와 분리가 안된다는 점입니다.(20000g, 1h)
특이한 점은 cell lysis 용액을 그 ... |
|
답변 0 | 2013.12.11 |
|
| Q. triton x-100이 하는 역할이 뭔가요?? |
| yeast lysis buffer에 triton x-100 이 들어가는데
이게 하는 역할이 뭔가요???
그리고 yeast total protein extraction하는 protocol좀 알려주세여!!!! |
| A. 저것 이외에도 여러가지 가 있지만...
가장 쉽게 생각할 것은 밥먹고 식기 닦을때 퐁퐁이를 왜 쓰는지와 세포의 구조, 특히 막의 구조를 알면 쉽게 이해가 될듯
두번째는 포탈에서 찾으면 주르륵... |
|
답변 1 | 2011.01.31 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
| [공지] 한국연구재단 검색은 해당 시스템 종료로 인해 서비스 종료되었습니다. |
|
|
|
