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| Q. Fluorometric 방법 측정시 background 값 |
| 저 현상이 그대로 유지되네요....
혹시 sample background가 sample값보다 더 높은 현상을 해결할 수 있는 방법이 있을까요 ... |
| A. 형광이 quenching되는 경우는 아닌가요?
(예, Blue excitation --> GFP emission = RFP excitation --> RFP emission)
kit의 파장대와 기기의 설정은 어떻게 되어 있나요? |
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답변 4 | 2019.04.01 |
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| Q. IP background가 심해요 |
| IP를 하는데 negative의 background가 심해요
lane에서 그 밑 부분은 깨끗하지만
103과 80kD 사이에 검게 잡히 ... 나오네요 ㅠ.ㅠ
피눈물같은 샘플들 ㅠ.ㅠ
어떻게 해야 그런 background를 줄일 수 있을지 방법을 ... |
| A. 1/10씩 3번 dilution해도 antibody에 잡힐 정도로 남아있다면, background는 계속 잡힐 것 아닙니까?^-^;
wash를 5~6번 정도로 더 늘려 보시고, 상등액을 50ul정도로 줄여보시는 것도 효율적인듯 합니다.
새로운 ... |
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답변 1 | 2008.10.07 |
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| Q. 많은 background 와 band 가 흐리게 나옵니다 |
| 적거나 antibody quality가 안좋거나 이럴경우 흐리게 나오고 background는 washing 이나 detection 문제일 경우가 많다고 하더라구요
저희는 ECL solution A,B 1ml씩 섞어서 membrane 재빨리 흔든다음 위에 뿌려주고 ... |
| A. 나올 확률이 높습니다.
4. blocking solotion의 농도를 높여주면 background를 낮춰주는데 도움이 됩니다.
5. target protein의 band를 잡았다면 protein의 양을 줄여주는 것도 하나의 방법이 될 수 있습니다 ... |
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답변 4 | 2013.12.23 |
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| Q. plamid background |
| cloning vector를 이용한 목적유전자의 PCR정제 후 발현 vector와의 ligation 및 transformation이 잘 안됩니다. 문제는 사용된 cloning vector의 background때문인것 같은데, background없애는 법 부탁드려요. |
| A. cloning vector의 background라니요???
무슨 말슴인지 잘 이해가 되지 않는군요~
vector를 겔에 내리면 cloning vector이외의 다른 band들이 보인다는 말인가요??
만약 그렇다면 gDNA contam이니 vector prep을 다시 해야합니다. |
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답변 2 | 2009.07.11 |
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| Q. IHC background가 너무 심해요 |
| 진행중인데 background가 너무 심해서 고민중입니다.
secondary antibody만 넣었는데도 형광이 쨍쨍하게 보입니다.
뭐가 문제인지 확인 부탁드립니다.
xylene 10min x2
100 EtOH 10min x2
95% EtOH 5min
70% EtOH 5min
50% EtOH ... |
| A. 이미지 파일을 첨가하면 답변 얻기 좋을겁니다. |
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답변 2 | 2019.05.21 |
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Q. IHC background 질문드립니다. |  첨부파일 |
| 실험하다가 background 떄문에 질문드립니다.
일반적인 protocol로 진행중이고,
blcoking, 1st antibody, 2nd antibody, ABC, DAB
매 step마다 1x PBS 5min 씩 2번 washing 을 하는데요.
Dehydration다하고 mounting 할때보면 사진에서 ... |
| A. 1차 항체, 2차 항체 혹은 ABC complex가 도포한 곳에 약간 남아, DAB 도포시 발색 되는 것 으로 추측 됩니다. 다만 IHC 결과에 크게 영향을 주지는 않았을 것으로 판단됩니다. |
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답변 3 | 2020.08.28 |
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| Q. immunohistochemistry의 background 제거하기? |
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immunohistochemistry에서 형광 dye로 염색 후,,
background가 심해지는 경우 사용하는 물질들이 무엇이 있나요~
그리고,,,,
다른 질문인데요,,
antibody가 western용으로만 제작된 것인데요,,
immunohistochemistry에 ... |
| A. Background를 줄이시려면 titer를 잘 조절하시고 blocking을 절절히 하시면 되겠지요. ^^
Antibody와 조직에 따라 blocking에 신경을 써 주셔야 할 것들이 있습니다.
Mouse 조직에 mouse 로부터 얻은 일차 항체를 쓸 ... |
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답변 1 | 2006.10.06 |
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| Q. western blot 잡밴드, background가 너무 심합니다...ㅠ(파일有) | 첨부파일 |
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참 사용한 ab는 1:1000으로 했습니다.
무엇때문에 저렇게 background랑 잡밴드가 심한지를 잘 모르겠습니다 ... |
| A. skimmilke 는 보통 signal 이 강한것을 잡을 때 쓰는데, 1, 2차를 1:1000으로 하셨으면...
2차를 1:10000으로 바꿔보시고 2차후에 TBS-T wash를 15min x 8 해보시고 찍어보세요 |
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답변 9 | 2013.05.27 |
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| Q. silver staining 시 background 가 너무 심합니다. | 첨부파일 |
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silver staining 시 background 가 너무 검게 나옵니다.
구글을 검색해서 여러 방법을 봤습니다만 여기서 혹시 또 어떤 해결책이 나올까 싶어서 질문올립니다. 혹시 어떠한 방법이 있을까요? 부탁드립니다. ... |
| A. silver staining 시 background가 높은 이유는 발색시간을 오래해서 그렇습니다. gel을 발색 시킬 때 육안으로 확인해 가시면서 적절하게 발색 되었을 때 바로 stop solution에 담그어야 합니다. |
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답변 1 | 2016.04.14 |
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| Q. westernblot시 매번 background가 다 탑니다ㅠ | 첨부파일 |
| 섞어서 1ml 뿌려서
xray film 위에 두고 현상합니다.
그런데 background가 매번 다 타서 전혀 형체를 알아볼 수 없습니다.
고수님들 ... |
| A. 모두 정말 감사합니다!
1Ab는 새것을 써도 저렇게 나와서 걱정입니다ㅠ
좌우로 shaking 40RPM으로 하고 있는데도 저렇게 나오는데 buffer양을 충분히 늘려서 다시 해보겠습니다:) |
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답변 6 | 2019.09.09 |
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