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정확도순 ㅣ 날짜순
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| Q. western band가 흐리게 잡히네요.. |
| 1차는 his-tag Ab를..
2차는 Mouse IgG HRP를 사용합니다.
ECL만 뿌리면 target band가 형광으로 눈에 띄게 보이는데
필름을 exposure하면 band가 답답할 정도로 흐리게 나오네요...
왜그럴까요.. |
| A. 다른 것 잡을때도 그런가요? 다른때와 비교해서 적어주시면 많은 분들이 답변하시기 편하실 것입니다.. |
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답변 2 | 2008.09.23 |
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Q. western blot band를 봐주세요. |  첨부파일 |
| stock한걸 희석해서 사용한거라..분명 같은 조건이면 같은 band가 나와야 하는데 요즘 모든 실험 결과가 엉망입니다ㅠㅠ
처음에는 Ab를 의심했는데 다시 만들어 새로 실험해도 역시나 같은 결과 입니다. ... |
| A.
SDS-PAGE에서 해상도와 분리도는 아주 중요한 요인으로서 band의 모양과 두께를 결정합니다. 이러한 문제가 생기는 원인은 많습니다만, 몇가지만 추려보면,
1. Sample protein의 over loading
2. unsuitable stacking ... |
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답변 3 | 2010.01.08 |
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| Q. PCR band가 갑자기 안나와요. | 첨부파일 |
| 잘못됐을까봐 gradient 돌려서 확인했는데도 gradient 조차 band가 하나도 안나오네요.
pre-mix를 사용중이고요.
pre-mix에 primer forward&reverse 1ul씩, DNA 1ul, DW 17ul 넣어서
조건은 95℃ 5분, (95℃ 30초, anneeling- 55℃ 3 ... |
| A. 사진에서 marker제외한 well이 전부다 smear가 보이는데
DNA양이 너무 많아서 그런건 아닐까 생각되네요
cDNA 인지 gDNA인지 모르겠지만 gDNA라면 농도를 1/10, 1/100 정도로 희석해서 해보시는게 좋을 것 같습니 ... |
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답변 5 | 2015.11.25 |
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| Q. westernbolt band문의입니다. | 첨부파일 |
| 안녕하세요~
westernbolt band문의입니다.
첨부파일에서 맨처음 있는 band가 NOS1인데요,,
다른 band에 ... 더 잘나오는데요,,
NOS1은 지나간 흔적이 심하고 band가 선명하게 뜨지 않습니다.
조언 부탁드립니다. ... |
| A. protein전체가 끌리고 있다면 결과적으로 최종 data인 western band의 모양이 좋을 수 없습니다.
과도하게 sample을 걸더라도, 좀더 sample을 깨끗이 정제한 후 loading했다면 이와같은 끌림현상은 다소 완화시킬 수 ... |
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답변 1 | 2010.04.29 |
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| Q. gel에서 band 위치에 따라 진하기가 달라집니다. |
| 할수 없을 정도로 흐릿하게 나옵니다..
one band 라서 다른 band가 끼이거나 그러진 않은거 같은데...
도저히 모르겠습니다. ... |
| A. gel이 편평한 경우, DNA는 이동하면서 윗표면으로 조금씩 손실됩니다. 따라서 전기영동을 하면 할 수록 농도가 떨어져 흐리게 보이게 됩니다. 1kbp와 100bp를 동량으로 loading한후 나중에 보면 100bp가 같은 ... |
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답변 3 | 2011.01.26 |
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| Q. western 시 band의 density....??? |
| ..
이럴때는 처치후 밴드가 보이지는 않지만 control의 Two band가 확연히 보이는 develp time으로 실험을 해야하는지요? 아니면 처치후의 밴드도 희미하게 잡혀 어느정도 읽을 수있는 시간으로 정해야 하는 ... |
| A. Control과 보시고자 하는 sample의 농도가 동일하다면 문제가 없을 것 같은데요. Control의 two band가 하 ... 더 벌리시면 될 듯 합니다. Exposure 시간을 조절하시는 것도 band의 진하기를 조절하실 수 있구요 ... |
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답변 1 | 2006.10.17 |
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| Q. [Western Blot] develop 후 특정 band |
| 들어 parp, casp3, actin 등 과같은 band는 잘나오는데
p53, mdm2와 같은 band가 잘 나오지 않습니다.
똑같이 loading을 했는데 왜 어떤 밴드는 나오고, 어떤 밴드는 나오지 않는 걸까요 ... |
| A. membrane에서 떨어져나가기 때문에 나중에 확인하는 Ab의 band가 약하게 나오거나 안나오는 경우가 있습니다 ... |
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답변 1 | 2016.09.21 |
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| Q. Band density에 따른 발현량 질문입니다ㅠ |
| protein의 발현양이 차이나서 고민입니다 ㅠㅠ
참고로 저 Band는 tubulin 입니다,
western blot 선배님들!! 도와주세요!!!
(저희 실험실 박사님들이 의견이 다르게 나와서 혼란스럽습니다 ㅜㅜ ... |
| A. protein이 없는 거라면 위 band를 써야할
것 같고..
위 아래 band가 각각 별도의 실험인가요?
짧게 exposure시킨 것과 길게 exposure 시킨 결과라면
길게 exposure 시키 후 반응 정지 시켜 결과를 획득하면 됩니다. ... |
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답변 2 | 2018.12.10 |
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| Q. col1a1 western blot band 좀 봐주세요... |
| 때문에 저렇게 나오는 것일까요??
몇일 찾아 헤메다 비슷한 band를 많이 봤지만 이에 관하여 언급하지 않아 궁금하여 여쭙습니다... 답변 주시면 감사하겠습니다 ... |
| A. 2 band로 보기에는 힘들것 같습니다.
전기영동 조건이 어떻게 되나요? |
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답변 4 | 2020.10.06 |
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