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실험Q&A    7,029건 정확도순 날짜순
Q. western blot에서, band의 감도 측정법??
western blot에서 감광해서 얻은 band의 강도를 수치화 하기 위해서 이를 측정하고자 하는데요.. 혹시 이를 측정하는 프로그램이 따로 있나요?? 아니면 간단히 수행할 수 있는 방법이 있나요?? band의 강도를 ...
답변 0  |  2009.04.09
Q. western band가 흐리게 잡히네요..
1차는 his-tag Ab를.. 2차는 Mouse IgG HRP를 사용합니다. ECL만 뿌리면 target band가 형광으로 눈에 띄게 보이는데 필름을 exposure하면 band가 답답할 정도로 흐리게 나오네요... 왜그럴까요..
A.  다른 것 잡을때도 그런가요? 다른때와 비교해서 적어주시면 많은 분들이 답변하시기 편하실 것입니다..
답변 2  |  2008.09.23
Q. western blot band를 봐주세요.  |  첨부파일 첨부파일
band가 예전처럼 나오지 않아서요. 위에 band가 기존에 결과 이고 아래 band가 요즘 결과 입니다. 기존 조건과는 모두 같구요. 하물며 모든 buffer 역시도 기존에 stock한걸 희석해서 사용한거라..분명 같은 ...
A.  western과는 전혀 무관한 결과입니다. Gel run에 문제가 있는 경우로서 western은 정상이지만, band의 모양이 나쁜 경우입니다. SDS-PAGE에서 해상도와 분리도는 아주 중요한 요인으로서 band의 모양과 두께를 결 ...
답변 3  |  2010.01.08
Q. PCR band가 갑자기 안나와요.  |  첨부파일 첨부파일
pcr을 하는데 band가 잘 나오다가 어느순간 갑자기 band가 안나와서 primer도 다시 주문해보고, 기계도 다른 pcr 기계 써보고, 다른사람이 해보고 DW도 바꿔보고 했는데도 똑같이 band가 안나와서요ㅠㅠㅠㅠ ...
A.  사진에서 marker제외한 well이 전부다 smear가 보이는데 DNA양이 너무 많아서 그런건 아닐까 생각되네요 cDNA 인지 gDNA인지 모르겠지만 gDNA라면 농도를 1/10, 1/100 정도로 희석해서 해보시는게 좋을 것 같습니 ...
답변 5  |  2015.11.25
Q. westernbolt band문의입니다.  |  첨부파일 첨부파일
안녕하세요~ westernbolt band문의입니다. 첨부파일에서 맨처음 있는 band가 NOS1인데요,, 다른 band에 비해 선명하게 나타나지 않습니다. sample은 크림에 DMA를 섞어 mouse skin에 도포한 후 채취한 것입니다. NOS2 ...
A.  Band의 위쪽으로 끌리는 듯한 모양의 원인은 overloading에 의한 것이 가장 주된 것이며, 또한 sample내 오염된 gDNA나 기타 불순물에 의한 것이 일반적입니다. SDS-PAGE에서 흔히 간과하기 쉬운 가장 중요한 요 ...
답변 1  |  2010.04.29
Q. gel에서 band 위치에 따라 진하기가 달라집니다.
중간쯤에 band를 확인 했을때엔 엄청 진하게 나왔는데요, marker band가 뭉쳐 있어서 조금 더 내려본다고 내렸는데, band 진하기가 중간에서 확인한것과는 비교 할수 없을 정도로 흐릿하게 나옵니다.. one ...
A.  gel이 편평한 경우, DNA는 이동하면서 윗표면으로 조금씩 손실됩니다. 따라서 전기영동을 하면 할 수록 농도가 떨어져 흐리게 보이게 됩니다. 1kbp와 100bp를 동량으로 loading한후 나중에 보면 100bp가 같은 ...
답변 3  |  2011.01.26
Q. western 시 band의 density....???
안녕하세요? western 후 band의 density에 대해서 궁금한 점이 있어 글을 올립니다... 제 샘플의 밴드는 two band인데요 control과 처치후 의 비교에서 약 처치후의 밴드가 줄어들기를 원하는 실험입니다... 그 ...
A.  Control과 보시고자 하는 sample의 농도가 동일하다면 문제가 없을 것 같은데요. Control의 two band가 하나로 뭉쳐보이는 것을 방지하시려면, control의 size에 따라 좀 더 낮은 %의 gel을 사용하시거나 전기영동 ...
답변 1  |  2006.10.17
Q. [Western Blot] develop 후 특정 band
WB하는데 잘 나오는 band, 잘 나오지 않는 band가 있습니다. 예를 들어 parp, casp3, actin 등 과같은 band는 잘나오는데 p53, mdm2와 같은 band가 잘 나오지 않습니다. 똑같이 loading을 했는데 왜 어떤 밴드는 나오고, ...
A.  WB에서 band가 잘 안나오는 경우는 다양합니다. 동일한 단백질양을 로딩하였다고 해도 세포가 가지고 있는 특정 단백질들의 양은 각각 다를 수 있습니다. 간단히 이야기 하면 위에 적어놓은 parp, casp3, ...
답변 1  |  2016.09.21
Q. Band density에 따른 발현량 질문입니다ㅠ
upload image 첨부한 band의 사진을 보면 위 band는 그 중간이 조금씩 비어있는 형태로 나타났고 아래 band는 그 중간이 매워진 형채로 나타났습니다 (둘은 같은 band로 exposure을 조절하여 각각 얻었습니다.) ...
A.  1. 제 생각에는 위 band는 1차 또는 2차가 덜 붙어서 나타난 형태라면 아래 band로 기준 을 잡아야할 것 같다고 생각하는데 어떻게 생각하시나요?! : ab가 덜 붙을 가능성 보다 단백질이 비어 있어 발색이 ...
답변 2  |  2018.12.10
Q. col1a1 western blot band 좀 봐주세요...
안녕하세요 western blot 결과를 보니 upload_image band가 두 줄로 잡혔습니다. cell sign. 의 COL1A1 Ab 를 사용하였습니다. data sheet에는 double band에 대한 언급은 없었습니다. 결과가 왜 두 줄로 잡히는지 모르겠 ...
A.  2 band로 보기에는 힘들것 같습니다. 전기영동 조건이 어떻게 되나요?
답변 4  |  2020.10.06
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