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'CRISPR/Cas9' 관련 검색광고입니다.
NEB EnGen® Cas family
실험Q&A    160건 정확도순 날짜순
Q. cas9 vector 에 대한 질문입니다
cas9 을 처음 시도하려고 합니다. pluripotent stem cell 에 cas9 vector를 transfection 하려고 하는데 addgene에 보니 너무나 많은 vector가 있어서 어떤 vector 를 골라야 할지 조금 막막합니다. cmv promotor 가 있는 vector ...
답변 0  |  2015.06.11
Q. Cas9Cas9 D10A의 차이가 궁금합니다.
Single strand break를 하는 걸로 알고 있는데요. Cas9 D10A는 Cas9보다 off-target effect가 낮다고 알고 있는데, 혹시 그 이유가 뭔가요?? 정말 궁금합니다! ...
A.  이 분야에 전문가는 아니지만... 캐스9의 열번째 아미노산이 디인데 에이로 바꿔 실험해보니 오프타겟이펙트가 더 낮게 나왔나보네요.. 오프타겟이펙트가 더 낮은 경우가 실험할 때 좋은 걸로 알고있 ...
답변 2  |  2016.02.03
Q. CRISPR-Cas9을 이용한 실험해보신 분께 조언을 구합니다.
잘 되어있는 추천해주실 만한 업체가 있을까요? (CRISPR-Cas9이나 Homology-Directed Repair 따로 추천해주셔도 좋습니다.) 4. 또한, HDR library를 이용하여 mutation과 관련된 functional study를 해보신 분이 있다면 ...
A.  1개의 염색체만 가지고 있습니다. 일반적인 cell에 CRISPR/Cas9을 사용할 경우 결국 Wildtype, Hetero, Homo의 3종류의 type이 나오고, 이들의 phenotype은 다양하게 나올겁니다. 이와 비교하였을 때, Haploid cell을 ...
답변 1  |  2021.06.22
Q. CRISPR/CAS9 vector 관련 질문입니다!
안녕하세요 CRISPR/CAS9 vector에 궁금한 점이 생겨 질문드립니다! 1번: pX330A_Fokl-1x2 vector 2번: pX330S- ... using all-in-one CRISPR/Cas9 vector system Fusion of catalytically inactive Cas9 to FokI nuclease improves the specificity of genome ...
A.  pX330A_Fok1 vector와 pX330S-2 vector는 모두 그림 가장 아래에 있는 "Fok1-dCas9 단백질 및 2~7개의 gRNA에 ... 사용 목적은 gRNA 서열을 cleavage하기 위한 재료 vector일 뿐, Cas9 protein을 사용하고자 하는 것은 아닙니다 ...
답변 4  |  2021.07.12
Q. Cas9 D10A에 대해서 궁금한 점이 있습니다.
여기서 도저히 D10A가 무엇인가요?? 지금까지 찾은 자료로는 Cas9의 한 부분이라고 밖에 모르겠는데, 아시는 분들 계시면 자세히 알려주시면 대단히 감사하겠습니다 ...
A.  Cas9의 열번째 아미노산인 D를 A로 치환한 catalytic mutant입니다.
답변 1  |  2016.02.03
Q. gene editing 관련하여 질문 드립니다 (Cas9 system)
하고 있는 학생입니다. 다름이 아니라 현재 제가 Cell에 Cas9 system 을 이용하여 gene에 reporter(fluorescene protein) 를 knock in 실험을 진행 중에 있습니다. 제가 알기로는 Cas9, gRNA, donor vector를 co-transfection하면 ...
A.  reporter혹은 cell stage에 따른 유전자 발현 관찰)에 따라 wt Cas9을 사용할지 dCas을 사용하는 것이 좋을지 생각해 봐야 할 것 같습니다. 그리고 어떤 셀라인을 사용하시는지 어떤 방식으로 전달하는지 ...
답변 1  |  2016.06.01
Q. crispr cas9 plasmid 관련 문의
crispr cas9 knock out plasmid를 사용할 것이구요 2개 vector sgRNA와 Cas9 plasmid를 co transfection 하여 cell안에 넣어서 knock out을 시킨 cell로 실험을 진행하면 되는게 맞나요...? 혹시 co transfection시 cell 양에 따른 plasmid ...
A.  encoding 하는 vector를 넣어주면 될 것입니다. gRNA vector와 Cas9 vector를 따로 transfection 해도 되지만 mammalian에서 한번에 작동시키는 all-in one vector를 사용하는 경우도 많습니다. (예 : Thermo사 GeneArt CRISPR Nuclease ...
답변 1  |  2020.01.20
Q. Cas9 , cas9 + gRNA vector 차이
cas9와 gRNA vecotr를 같이 넣어주게 되면 기존 cas9 만 넣었을때랑 차이가 어떤건지 알수있을까요?
A.  숙제인가요? Cas9 이랑 gRNA 가 각각 무슨 역할을 하는지 알면 대답이 될 것 같습니다.
답변 1  |  2022.07.12
Q. crispr cas9 도와주세요~
K/O여부를 쉽게 확인하기 위해 GFP 및 flag taaging 된 Cripr cas9 vector를 업체통해 제작한 뒤 실험에 사용했습니다. 일단 cancer cell에 사용하기 전에 vector working 부터 확인 하기 위해 293TN에 transfection 한 뒤 GFP가 ...
A.  들어가서 Cas9이 발현을 했다는 것을 보여주려는 것이구요 Cas9 vector가 genome에 integration이 되지 않으면 GFP/FLAG도 사라지겠죠.. 정확한 것은 INDEL을 NGS (next generation sequencing)을 돌려서 확인하시면 됩니다. ...
답변 2  |  2020.02.17
Q. CRISPR/Cas9 system을 도입하려고 합니다.
down하고자 하는데 적절한 gRNA를 찾아서 올리고 합성하고 Cas9 plasmid를 구입하여 gRNA를 넣으면 되는건가요??^^;;; 혹시 관련된 실험 하시는 분들 계시면 답변 부탁드립니다.. ...
A.  반갑습니다 크리스퍼 셉업단계 랩입니다. PX335같은 vector에 짠 sgRNA를 ligation 하는데요. knock out 을 만드실거면 nickase로 하실건지 one-cut으로 하실건지요. CRISPR tool 구글에 치면 나와요 one-cut으로 하실거면 ...
답변 3  |  2014.06.17
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FemtoJet 5247 | 광주과학기술원 | 2009.06.03
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