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실험Q&A    340건 정확도순 날짜순
Q. caspase-3 (추가질문이에요.)
단백질량은(40ug) 그리고 제가 사용하는 cell 라인은 caspase의 타겟이 있습니다.. 혹시 분자량이... 작을 때 SDS-page농도를 바꾸어야 하나요.. 아참.. 그리고 인산화된 활성형 형태의 안티바디들은.. 잘 ...
A.  지금 같은 cell signalingd에서 나오는 caspase-3 쓰고 있거든요..^^ SDS-PAGE로도 충분히 잡힙니다..안티바디 확실합니다.. 제경우는 15-16% gel을 쓰고 있습니다.. 10-15 KDa 짜리 protein도 잘 잡히니깐 걱정하지 ...
답변 1  |  2006.04.12
Q. caspase-3
cleaved caspase-3 (cell signaling 제품이에요) 에 대해 물어봤었는데요.. 어떤 분이. 친절히 가르쳐 주신대로.. 실험을 다시 했는데.. 필름에.. 잡밴드 하나.. 없이. 그냥.. ㅠ.ㅠ 제가 한.. 방법은. 아무것도. ...
A.  빌리실수 있으시다면 그것으로 한번 다시 해보세요.. caspase-3 경우에는 normal상태에서도 full length는 잡힐테니깐.. 저도 primary는 1:1000 (4도 overnight)secondary는 1:3000-5000 (상온 2시간)으로 사용합니다. ...
답변 2  |  2006.04.19
Q. cell culture후 caspase-3할때
키워 H2O2와 보호 약제를 넣고 48시간 후에 caspase를 fluorometer로 재고 있습니다. (biovision) 이제까지는 48시간 후 PBS로 한번 washing하고 cell lysis buffer로 녹였는데 오늘 보니 세포들이 많이 메디아에 떠 있어서 ...
A.  세포가 떠있다면 그 세포는 버리고 하는게 원칙이긴 합니다만... 떠있는 세포까지 필요하시다면 뒤의 방법대로 하시면 되겠네요
답변 2  |  2009.06.18
Q. caspase3 어떤회사가 좋나요
apoptosis 를 위해 western을 하기 위해 caspase 3 항체를 구입하려고 합니다. 스그마를 보니 200ul에 세금포함에서 53만원가량 하던데요 혹시 가격도 저렴하고 잘 잡히는 회사것 좀 추천해줄수 있으세요?
A.  가격은 기억이 안나고요..저희같은 경우도 caspase 3, 9를 봤었는데 산타크루즈걸로 사용했구요..디텍션은 잘 됐었구요..글구...아 두가지다 total를 봤었습니다
답변 2  |  2006.06.05
Q. CASPASE-3
CLEAVED CASPASE-3을 보려 합니다. WESTERN BLOTTING을 이용하여서 보려 합니다. 안티바디는 CELL SIGNALING을 . 사용하였고 PRIMARY 는희석배수는 1:1000으로 오버나잇을 하였습니다. 그리고 SECONDARY는 1:2000으로 ...
A.  + control을 한번 해보세요. 카탈로그에 보시면 나와있지 않을까요?
답변 2  |  2006.04.11
Q. caspase 3 Ab...
caspase 3 Ab 잘 나오는 회사 추천 부탁드려요. western 할건데요, 회사별로 Ab도 잘 안 나오는것들이 있다고 해서... 선생님들의 조언 부탁드립니다.
A.  저희 실험실도 싼타크루즈꺼 사용해요 프로폼 잡는거면 추천해 줄 만하네요 싱글밴드로 잡는 앤티바디입니다.
답변 4  |  2003.05.31
Q. caspase activetion 측정할 때 어떤 제품이 좋은가요?
안녕하세요 caspase activation assay를 하려고 kit 알아보고 있습니다. 어떤 제품이 좋은가요? 주로 쓰시는 제품이 뭐죠? 혹시 biovision 제품은 어떤가요? 조언부탁드립니다 ~
답변 0  |  2010.11.02
Q. caspase-8 gene transfection 후 colorimetric assay
caspase-8 유전자를 Prodomain을 제거한 서열을 pc3.1 hig vector cloning하여 fish cell에 transfection하였습니다. transfection후 50h때 caspase-8 활성을 보는 caspase-8 Colorimetric Assay 하였습니다. 근데 Nomal cell 이랑 아무런 ...
A.  overexpression 만으로도 활성화 되는지 확인이 필요하겠구요. caspase 활성을 보려면 최대로 활성화 되는 시점을 선택하는 것이 중요하다고 들었는데 50시간 후에 활성을 보는 게 일반적인 방법 맞나요 ...
답변 1  |  2015.08.20
Q. santa-cruz사 caspase-3를 이용하여 WB를 진행하고 있는데,
cruz사 caspase-3를 이용하여 천연물의 항암효과를 보는 WB를 진행하고 있는데, caspase-3 p17이구요. (caspase-3 subunit이 p11과 p17) caspase-3는 cleved form, inactive form 이 존재하는 걸로 아는데 그럼 결과를 확인할 때 ...
A.  datasheet를 확인해 보셔야 합니다. 그런데 대부분 procaspase-3 (inactive:32kDa), cleaved-caspase-3 (active form:17, 19kDa) 두개 다 잡습니다 ...
답변 1  |  2014.05.24
Q. caspase inhibitor 질문입니다.
있는 drug이 caspase depedent한 apoptosis 인지 보기 위해서 caspase inhibitor를 처리하고 있는데요. 이 drug 을 처리하기 2시간 전에 inhibitor 를 pre-treatment 하고 washing없이 그 상태로 실험 하고자 하는 drug을 ...
A.  zVAD보단 좀 약할 수가 있어서, 사실 inhibitor만으로 caspase-8-dependent, caspase-9-dependent 를 구별하는 것이 쉽지는 않아요, 간접적인 방법으로, caspase-8과 caspase-9 cleavage를 western blot으로 확인할 수 있어요^ ...
답변 2  |  2012.02.05
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