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| Q. 죽은 cell이... |
| 해야 할지...
이대로 stock을 하면 당연히 좋지 않겠죠?
cell culture 고수님들의 짧은 답변 부탁드립니다.
이 겨울이 무지 춥군요.. ... |
| A. 죽었다 판단마시고, tryphan-blue exclusion assay를 하여 정확한 cell counting을 하여 세포의 생존율을 조사해보세요.
그리고 세포 상태가 안좋아지는 이유는 아시겠지만, 적당한 분주비율을 유지 못하여 ... |
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답변 4 | 2003.11.12 |
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| Q. SH-SY5Y cell 질문드립니다...ㅠㅠ도와주세요 |
| stock을 풀었는데 잘 안붙는 것 같아서요..
처음 다루는 cell 이다보니 더블링타임도 잘 감이 안와서..어느정도 되나요 쓰시는분들?
MEM media를 쓰라고 권장되어 있던데... 많이 다르진 않은 것 같아서요.. ... |
| A. 같습니다..
ㅠㅠ...media change할때도 엄청 조심스럽게 붙은 cell이라도 안떨어지게 하느라 조심스럽게 합니다만...ㅠㅠㅠㅠㅠㅠㅠㅠㅠ걱정됩니다... |
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답변 10 | 2016.04.26 |
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| Q. (급) cell stock 만들때.. |
| cell stock 만들기에 도전중입니다..
조성을
10% FBS
10% DMSO
5% 페니실린
나머지 media
로 했는데,
FBS, DMSO, 페니 ... 색이 뿌옇게 되면서 열이 나더라구요요..
이거 괜찮은 건가요?
cell이 제발 죽지 않기를... |
| A. 세포배양할때 페니실린 넣어주는데요
그래서 stock만들때도 넣어준건데
stock만들때 페니실린 넣는게 아닌가요..??
그리고 벤치 안에 ice box 넣어도 되요? ^^;;;;; |
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답변 5 | 2004.06.22 |
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Q. cell counting 질문 드립니당. |  첨부파일 |
| cell counting 하여 cell seeding 하려고 하는데
헷갈려서 질문 드립니다.
제가 직접 계산해서 이미지 파일로 올렸는데 이렇게 하는게 맞는건가요? ㅠㅠ |
| A. 양은 2.3ml 이 필요합니다.
질문자가 실수하신 부분은 총 Cell의 수를 구해놓고 단위는 ml로 했다는 것입니다.
지금 구하신 식에서 5를 곱한것을 빼면 ml 당 셀의 계수를 얻을수 있습니다 ... |
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답변 3 | 2016.03.11 |
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| Q. 6well seeding 후 media change만 해주면 cell이 이상해져요 ㅠㅠ |
| ..
3) 파이펫팅하는 과정에 힘이 과했다던지..
cell 상태를 정확히 보여드려야할것같아서 사진도 첨부해요
많은 조언부탁드려요 ㅠ
두사진 같은 well 이며 2번째사진이 morphology가 이상한 상태입니다.
upload ... |
| A. 저도 같은 현상 겪었었는데, Plate 바꾸고 나서 괜찮아졌습니다.
참고로, 당시 제가 사용하던 6 well plate가 SPL사에서 제작된 것이었고
나중에 바꾼 Plate는 CytoOne에서 구입하였습니다.
도움이 되셨으면 합 ... |
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답변 5 | 2019.03.12 |
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| Q. cell stock 시 FBS와 DMSO의 비율.. ㅠㅠ |
| 할려고 하는데요 1:9 또는 2:8 정도로...
DMSO의 비율 때문에 cell이 damage 입고 죽어 나갈꺼 같은데
성공 시킬 방법이 없을까요?
무조건 성공 시켜라고 하는데.. 좀 답답 하네요
주위에 물어봐도 다들 글쎄 ... |
| A. -40도로 바로 스탁을 얼릴 때 셀 상태가 좋았다면 다시 풀었을 때
50% 이상은 살아 있을 거 같네요
예전에 스탁을 만들어 -20도에 둔 걸 깜빡하고 일주일 넘도록 두었던 스탁을
후에 버리기 아까워서 풀 ... |
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답변 3 | 2009.03.03 |
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| Q. sh-sy5y cell culture | 첨부파일 |
| sy5y cell입니다.
DMEM/F12 +10%FBS에서 키우는데요..
얼마전부터 cell 주변에 분비물(?)(사진상에 검은색 점으로 보이는 것)들이 많아졌습니다.
배지도 바꿔보고 새로운 stock을 풀어봐도 똑같습니다.
처음으로 ... |
| A. 확대해서 봤을 때 움직이진 않나요???
주의해서 잘 관찰해 보셔야 할 것 같아요.
만약 움직인다면 세포가 오염되었을 가능성이 큽니다. ^^:;; |
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답변 2 | 2009.02.25 |
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| Q. Cell lysis 관련해서 고생하는 초보대학원생 입니다. 전문가 분들의 의견 부탁드립니다 |
| 배지 제거 후에 pbs wash를 안하고 pbs 넣은 상태에서 cell을 긁은 적도 있는데 이 때는
pbs를 pellet까지 다 제거하지 않고 약간 남겨서 pellet을 200ul pipette으로 resuspension한 후e-tube에 pbs 채워서 4) 조건과 ... |
| A. 근데 단백질 정량하시는방법이 그냥 흡광도 재서 10곱하나요? standard curve같은거 안만드시나용 |
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답변 16 | 2021.10.25 |
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| Q. cell count &seeding 확인요~~ |
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제가 아는 것은 [(최종농도)/(현재농동)]*용량입니다.
즉, cell count했을 때 1*10^7/ml이고
96well에 1*10^5의 농도로 200ul씩 분주할 경우
[(5*10^5)/(1*10^7)]*20ml = 1000ul
-> 배지 19ml에 1*10^7/ml인 것을 1ml 섞어 200ul씩 ... |
| A. 예 맞습니다...
계산 잘 된것 같습니다. |
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답변 6 | 2010.05.18 |
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