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정확도순 ㅣ 날짜순
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| Q. gDNA로 PCR하는 경우 양은? |
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gDNA를 PCR해서 loading해서 band를 봐야하는데요
이때 필요한 gDNA의 최소한의 양이 어느정도 필요한지 궁금합니다.
보통 저는 100ng정도를 했었는데 sample중에 너무 적은 경우도 생겨서 이렇게 질문하게 ... |
| A. 것으로 생각합니다.
따라서, 님께서 충분히 많은 인체 혈액 gDNA로 먼저 님의 조건에서 테스트 해 보시고 감을 잡아 보기를 권합니다.
좋은 결과 얻으시길 바랍니다 ... |
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답변 3 | 2013.11.29 |
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| Q. gDNA에서 target gene 증폭 |
| 추출하여 제가 원하는 유전자를 클로닝 하려고 합니다.
gDNA는 겔 사진에서 보면 10kb 위쪽에 단일밴드로 나왔습니다.
primer도 genetyx 이용해서 Forward, Reverce 제대로 맞는지 다 확인했구요...
제가 원하는 ... |
| A. 정확히 뭘 의미하는 지 모르겠군요.
(추출할 때 shear stress등으로 인해서 gDNA가 조각나는 것은 당연하지만요. ... |
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답변 3 | 2009.07.18 |
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| Q. gDNA를 PCR하게 되면.. |
| 제가 gDNA 50ng을 PCR을 했습니다. cycle은 34cycle을 했습니다.
그러면 PCR product에 DNA는 얼마나 증폭되어 있는 건가요? 양이 얼마 정도 인지
알고 싶습니다. 도와주세요~ㅠ |
| A. 보통 PCR 을 시행하게되면 2의 N승 양으로 증폭됩니다.
N수는 CYCLE수를 의미하고요.
50ng DNA를 34 cycle증폭하셨다면
50 x 2^34 ng/ul 로 증폭되신겁니다. |
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답변 1 | 2013.12.05 |
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| Q. gDNA 추출 후 DNase I 처리를 통한 분해양상 |
| 98%로 고순도로 추출 하였습니다.
후에, DNase I 를 처리하여 gDNA 분해 양상을 확인하고 싶은데
마땅한 protocol이 없습니다. 대부분이 RNA 추출 후에 DNase를 처리하는 내용입니다.
혹시 알고 있는 protocol 혹은 ... |
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답변 0 | 2014.10.07 |
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| Q. bacterial genomic DNA의 transposon insertion site 확인방법 |
| gel의 comb하나하나를 매우 크게 만들어야 하는가(많은 양의 gDNA를 digestion해야하는지) 혹은 일반 comb의 band 1~2개만으로 kit로 회수해도 되는지
이것과
2. genomic DNA상의 unknown region을 찾는 방식에 더 효율이 ... |
| A. 후 self-ligation을 시키면 복제원점과 항생제 마커 그리고 gDNA 일부를 가지는 플라스미드가 만들어집니다.
그걸 대장균에 transformation시키면 콜로니가 얻어지고 그걸 sequencing합니다.
님이 사용하신 Tn 벡터 ... |
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답변 5 | 2016.03.09 |
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| Q. primer junction부분과 gDNA에 관련 질문입니다(PCR) |
| 어떻게 해결을 해야 하는지 모르겠습니다.
예를 들어,
A(gDNA가 들어있는 샘플)와 B(순수한 RNA) 샘플이 있습니다.
PCR을 하면 제 생각에는 A,B 둘다 타겟 밴드만 잡힐 것이라고 생가합니다. 물론 non-specific ... |
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답변 0 | 2011.08.09 |
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Q. gDNA PCR 결과 좀 봐주세요.. |  첨부파일 |
| 것이 유전자의 발현양의 차이라고 볼 수 잇는건가요..?
gDNA로는 처음으로 pcr을 수행하는거라 data 해석에 애를먹고 있습니다.. ㅠ
답변 부탁드립니다. ... |
| A. 배 증가한 상태이니까요.) 샘플별로 차이가 나는 경우라면 gDNA 추출에 들어간 세포의 수, 추출 효율의 차이, 그리고 PCR 과정에서 증폭이 얼마나 잘 되었는가 등의 요인이 있을 수 있습니다.
좀 ... |
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답변 1 | 2013.12.05 |
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| Q. gDNA extraction 질문이에요 |
| 빠져나온 액체를 센돌이 돌리면 pellet이 생길까요?
gDNA 분리하는 김에 cell wall 도 같이 분리할 수 있는 방법은 없는걸까요? ... |
| A. 핵산종류에 속하는 RNA등을 분해시킴으로써 비교적 순수한 gDNA를 얻을 수 있는것이고, 이를 보다 간편하게 하기위해 최적의(?)조건으로 buffer와 column이 만들어져 kit형태로 판매되는 것입니다.
고로~ kit을 ... |
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답변 1 | 2015.03.23 |
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| Q. gDNA를 이용한 PCR |
| 녹였다를 반복하진 않았습니다.
무엇이 문제일까요? gDNA가 불안정 했던 것일까요? Elution bfr로 DNA를 녹였는데,,
물로녹여야 할까요? 아니면 컨탐 문제일까요?ㅜ
찾아보니 virsu가 ssDNA로 존재하던데, ... |
| A.
RT-PCR을 제외하곤 균이던 virus이던 mammalian cell이던 gDNA를 주형으로 하는 모든 PCR에서는 정제과정없이 sample을 직접 넣어 PCR을 하고 있습니다. 전혀 문제없고 오히려 더 잘 됩니다 ... |
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답변 2 | 2010.03.26 |
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| Q. gDNA 뽑은 후 gel electrophoresis한 결과에 질문이 있습니다 |
| 과정에서 loss가 많이 발생한 것으로 봐야할까요?
최대한 gDNA sample에 RNA를 다 없애고 싶은데 RnaseA treat하고 나니 DNA가 너무 줄어들어있어서 어떻게 해야할지 고민입니다.ㅠㅠ
upload ... |
| A. 그럼 1,2,3번 샘플은 RNA contamination이 적다고 봐도 괜찮을까요? 만약 그렇다면 RNaseA treatment없이 그냥 실험을 진행해볼까합니다 |
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답변 3 | 2022.05.05 |
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