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실험Q&A    3,477건 정확도순 날짜순
Q. Gel loading
크리가 약 5kb 정도인 DNA는 0.7% agarose gel loading 하면 될까요? 50v에서 한시간 정도 내리려고 하는데... 아니면 100v에서 30분정도 내리는게 적당할까요? 1kb 넘는건 처음 내려봐서요. ^^;; 그럼 즐거운 한 주 ...
A.  가능합니다. 0.7~1% 사이에서 사용하세요..
답변 2  |  2008.12.08
Q. loading control로 사용되는 a-tubulin
있는 미세소관의 단위체로 알고있는데 이게 어떤이유로 loading control로 사용되나요? 또한 튜불린의 양이 세포마다 차이가 있나요? 세포마다 구성성분도 다르고 모양도 다른데 차이가 안나나요??? 진짜 ...
A.  보는 gene이나 Protein이 양의 변화가 있다 하더라도 loading control이 들쭉날쭉하면 양의 증감에 대해 논할수가없는건데 왜지..설명하기가 왜 어려운걸까요..밑에분께 떠넘깁니다 ...
답변 1  |  2016.02.12
Q. transformation 과정중. (10x loading buffer 6x loading buffer.)
DNA를 loading할때 6x loading buffer를 사용중에 모자라서 10x loading buffer를 희석해서 6x로 만들어 사용하였습니다. 이때,10x짜리 600ul에 멸균수 400ul를 넣어 vortexing 하였습니다. 이것이 맞는지요? 2. purified pcr ...
A.  네 맞습니다. 아래 그림과 같이 양이 적었습니다. extraction 뿐만 아니라 아마도 pcr부터 다시해야겠죠?답변해주셔서 정말 감사합니다 !!
답변 4  |  2013.02.22
Q. sds sample loading 시에 가라앉기 보단 위쪽으로 퍼지는것 같습니다..
하구요.. PCR로 loading와 단백질 샘플 섞은 뒤 끓여주는데요. loading buffer는 5x짜리로 사서 쓰고 있습니다. 제가 배우기론 끓는물에 넣지않고 pcr로도 충분하다 그래서 하고있는데 실험 중 어떤 부분이 ...
A.  한번 5x loading buffer 직접 만들어서 써보시는건 어떤가요..? buffer의 문제일수도 있으니
답변 2  |  2012.09.26
Q. western blotting에서 gel에 sample buffer loading
할때 pipetting 을 어케하시나여 ? bradford assay 한 후 정량하여 loading 하는데 dye를 pipetting 하여 tip에 빨아들이고 다 넣나여? 아니면 평상시처럼 눌럿을때 걸리는데서 멈추고 바로 빼나여? dye 가 running buffer ...
A.  SDS Dye가 SDS-sample buffer를 말씀하시는건가요? Sample buffer는 점성이 있어서, 사실 tip으로 딴 모든 volume을 정확히 lane마다 넣기는 쉽지 않죠 저같은 경우는 걸리는데서 멈추고 바로 뺴게 되면 tip안에 남는 ...
답변 4  |  2013.05.22
Q. western loading control
.정말 혹시....washing을 너무 세게 하면 antibody가 떨어지나요? loading control이 흔들리니 도대체가 data를 믿을 수가 없습니다 ...
A.  , Ab binding이나 wash가 문제가 된다면,, 한 샘플을 10개 똑같이 loading해서 웨스턴 블랏을 하면 알 수 있겠죠,, (거의 똑같겠지만,, 약간의 편차는 생길 수 있겠지만요) 전 보통 5% skim milk에 antibody를 ...
답변 1  |  2010.08.10
Q. 안녕하세요 전기영동할 때 loading dye 양 질문드립니다.
분석합니다. well에 loading하는 총 부피를 24 uL로 하고 싶을 때 6X Loading dye를 얼마를 넣으면 되나요? 답변 주시면 감사하겠습니다. ^ ...
A.  6X 라는 말의 의미는 사용하고자하는 농도(1X)의 6배 농축 용액이라는 뜻입니다 그래서 사용될 용액(또는 샘플)의 총 volume의 1/6을 쓰시면 됩니다 여기서는 총 volume이 24 ul니까 4 ul 사용하시면 됩니다
답변 2  |  2022.06.13
Q. loading dye x개념 여쭤봅니다
아닌지요?... DNA는 모두 1ul만 사용합니다.. 샘플양 대비 loading dye의 양을 어떻게 맞춰야되는건지 개념이 잡히질 않습니다.. 시키니까 그냥 하긴하는데.. 비전공자이긴 하지만 그래도 이화학실험을 ...
A.  6X 짜리를 1X로 희석해서 사용한다고 생각하시면 될 것 같아요 그래서 DNA 5 ul, dye 1 ul를 넣으면 dye가 1/6이 되는거잖아요? 읍 간단한건데 설명하려니 어렵네욥 X를 찐하기??농도??정도 생각하면 될것같아 ...
답변 2  |  2018.05.26
Q. 6x RNA loading dye
6x RNA loading dye의 조성은 잘 찾을 수가 없네요.. DNA의 loading dye 만드는 방법에서 DEPC-D.W 를 사용하기만 하면 상관없나요? 너무 기본적인 질문 같지만, 고수 여러분들의 조언 부탁드립니다 ...
A.  주는 것을 방지하기 위함입니다. 참고로 Fermentas의 2X RNA loading buffer 조성은 다음과 같습니다. EtBr이 미리 섞여 있습니다. 95% formamide,0.025% SDS,0.025% bromophenol blue,0.025% xylene cyanol FF,0.025% ethidium bromide,0.5 mM ...
답변 2  |  2011.08.02
Q. loading dye 와 sample loading buffer 는 다른가요?
여기 올리신 여러선배님들의 글 잃어보니까요. loading dye 만드는 법과 sample loading buffer 만드는 법 둘 다 있던데. 약간씩 조성에 차이가 있더라구요. 다른건가요?~ 각각 언제 사용해야하는지
A.  dye는 공통적으로 들어갑니다. 또한 sample loading buffer, gel loading buffer, sample buffer 등 다양한 이름으로 불립니다. 기존적인 조성은 Maniatis의 Molecular Cloning에 있는 조성을 원칙으로 생각하시면 됩니다 ...
답변 2  |  2005.01.25
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