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실험Q&A    190건 정확도순 날짜순
Q. Lymphocyte culture 방법
Lymphocyte culture method를 어떻게 구할수 없을까요?(자세하게) mouse spleen과 blood에서 (T cell) culture 하는 방법을 가르쳐주세요.. MAX 를 이용하는것도 있고 다른것도 있는것 같은데 여러가지 방법을 알수 ...
답변 0  |  2007.07.18
Q. lymphocyte isolation &culture에 관하여 조언부탁드릴게요..
있던데...각각이 다른개념인것인지 잘 모르겠습니다 또한 lymphocyte를 분리한 후에 culture 하기위한 과정을 좀 알려주세요.. 제가 능력이 부족해서인지 방법이 자세하게 나와있는 것을 잘 못찾겠습니다. ...
A.   ㅎㅎ 그리고 lymphocyte에는 T cell 말고도 B cell 도 있으니깐.. lymphocyte = T cell 이라고 말하기가 그렇겠죠..? 그리고 분리 후에는 그냥 RPMI-1640 사용해서 바로 실험해서..더이상은 저도.. ^^ ...
답변 2  |  2006.06.08
Q. CFSE를 이용한 lymphocyte proliferation assay
염색은 더 안된것 같습니다. 다른 분들은 어떤 조건에서 lymphocyte를 CFSE로 염색하시는지 궁금합니다. 그리고 제 실험에서 어떤 부분이 잘못되었을까요? 논문을 찾아봐도 서로 조건이 다르고 방법이 ...
A.  1. 1 uM CFSE (with 5% FBS in DPBS) 100 ul 라고 하셨는데요. 이 "5% FBS" 때문에 labeling이 잘 안되었을 수도 있겠네요. CFSE는 단백질에 결합되는 것이니까, 반응buffer에는 반드시 FBS가 없어야 합니다. CFSE labeling하기 ...
답변 3  |  2010.05.24
Q. Lymphocyte culture 질문입니다.
부착되어 분리가 안된건지 궁금합니다.. 또한 starvation이 lymphocyte에 어떤 영향을 주는지도 알려주시면 감사하겠습니다@@ upload ...
A.  cells 이 가장 많아요. cells % 는 확인해 보세요. 나중에 이런 lymphocyte들을 각각의 cells로 분리하여 특정 cytokine으로 culture해 보시면 더 자세히 관찰이 가능할 거에요^^ 하지만 plate에 붙어있는 것은 전체 ...
답변 1  |  2016.07.13
Q. lymphocyte culture 하시는 분 조언부탁드릴게요..
mononuclear cell을 분리하는 것 까지는 했습니다. 그다음에 lymphocyte만 분리해서 culture하는것을 어찌해야할지... cell culture는 한번도 해본적이 없어서 protocol을 봐도 난감하네요^^;; 아시는 선배님들 자세한 ...
A.  lymphocyte 분리는 우선 관련 논문을 보심이 좋을 듯 하구요. MACS에서 CD19(B cell) 또는 CD3(T cell) bead를 이용하여 분리하는 방법이 있습니다. 아님 MNC에서 CD14(monocyte)를 분리하여 제거 후 나머지 세포를 ...
답변 2  |  2006.06.15
Q. lymphocyte freezing
없어서 좀 얼려둘려고 합니다. cell이 너무 많아져서요.. 혹시 lymphocyte freezing stock 만드는 방법 아시는 분 안계신가요 ...
A.   -70C에 하루간 놔두고 다음날 질소탱크로 옮겨줍니다. lymphocyte는 크기가 크기 때문에 이러한 방법을 사용하지 않으면 생존률이 많이 떨어집니다 ...
답변 1  |  2008.09.23
Q. mouse blood로 부터 lymphocyte 분리에 관한 질문입니다.
lymphocyte 만을 분리하려고 합니다. 이때 mouse 혈액으로 부터 lymphocyte 를 분리하는 protocol 또는 논문을 구합니다! 알아보니 거의 장기(spleen, heart)로부터 채취를 하더라구요 혹시 정보 가지고 계신 분 ...
A.  투명한 plasma layer를 lymphocyte 층의 약 2-3mm 위까지 제거 7. Lymphocyte 층과 LSM 층의 반 정도를 수거하여 깨끗한 centrifuge tube 로 옮기고, 동량의 buffered balanced salt solution을 첨가. cell에 영향을 주지 않으면서 ...
답변 2  |  2013.07.19
Q. blood에서 lymphocyte 분리 질문
이용해서 lymphocyte를 분리한 후 culture는 어떻게? 3. 분리된 lymphocyte는 얼마나 오래 culture가 가능한가요? 초보라 아직 모르는게 많아요~ pubmed에서 열심히 뒤지고 있지만 쉽지도 않네요~ 좋은 답변을 ...
A.  bottle에 heparin을 넣어서 사용하셔야 하구요... 저는 lymphocyte를 분리하여 바로 실험에 사용(cytotoxicity측정)해서 culture는 해보질 못했는데..특수한 media가 있는 걸로 알고 있습니다.. RPMI 1640으로 culture할 ...
답변 1  |  2006.05.09
Q. lymphocyte stimulation test 에 관해 아시는분 도와주세요ㅠㅠ
lymphocyte stimulation test에 관하여 알아보아야 하는데 자료를 찾아봐도 구체적이지가 않고 모호해서 어떻게 해야할지 잘 모르겠습니다. 이에 관한 내용과 방법을 잘 아시는 고수님이 계시다면 도움 ...
A.  lymphocyte stimulation test를 구체적으로 적어주셔야 대답하기 좋겠네요 아시겠지만 lynphocyte라 해도 한개의 세포군이 아니라 T,B mono등 다양한 세포들의 집합체일수도 있습니다. 또한 stimulation이란 부분도 ...
답변 2  |  2006.03.28
Q. Lymphocyte culture 시 배지 교환 방법은? 고수님들의 조언 부탁해요!
Spleen에서 lymphocyte를 추출하여 배양하고 있습니다. (mitogen에 의한 proliferation test 중입니다.) whole spleen cell을 96 well plate에 well 당 5 x 10^6 or 2.5 x 10^6 씩 seeding하고 RPMI 1640 90% + FBS 10% 배지를 200ul 되도록 ...
A.  cell을 너무 high density로 까신 듯 한데요. well에 200ul 들어가는데 5*10exp6으로 까셨다면 5*10exp6/200ul=2.5*10exp7/ml 수준이잖아요. cell이 너무 많으니 당연히 배지도 금방 산성으로 바뀌겠지요. 제 경험으로는 1* ...
답변 2  |  2006.10.24
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