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실험Q&A    351건 정확도순 날짜순
Q. Quikchange site-directed mutagenesis에서 궁금한 점이 있습니다.
판매하는 kit를 이용해서 mutagenesis하는 방법에서.. 질문이 있습니다..(좀 엉뚱할 수도 있어요) mutation 시키고자 하는 염기가 포함된 상보적인 primer를 이용해서 plasmid 전체를 PCR 하는데.. 첫번째 cycle에서 ...
A.  그림을 그리면서 설명하면 쉬운데 글로는 설명하기가 어렵습니다. 최종적으로 PCR product는 양끝에 primer bind site를 중복해서 가지는 linear dsDNA가 만들어 질 가능성은 없나요? -> 그럴 가능성은 없습니다. ...
답변 3  |  2007.12.15
Q. site-direct mutagenesis
PCR 을 이용한 mutagenesis보다 많은 장점이 있는건지? mutagenesis방법으로 어떤 방법이 더 선호되고 있는지 알고 싶습니다,, ^ ...
A.  제가 이걸로 석사 학위 논문 썻습니다. frame shift mutation을 일으킬 때 중요한 것은 ATG(start codon)이 적은 것을 택하는 것이 중요합니다. sequence를 보시고 엄한 product를 생산하지 않는 것이 중요할 것 같군 ...
답변 6  |  2007.03.27
Q. arabidopsis mutagenesis
무엇이 잘못된 걸까요? mutagenesis를 잘못한 건지...mutagenesis후 항생제 있는 plate에 뿌리는게 아닌건가여? 2번째는 arabidopsis transformation을 수행하였는데여...(방법은 지금까지와 동일=이상없음) 항생제가 ...
A.  EMS mutagenesis를 한 후, 바로 항생제가 포함된 solid media에 뿌리는게 아니라, mutagenized된 seed들을 흙에 뿌려서 키워야 하는걸로 압니다. 나중에 그 seed들이 자라서 seed을 얻은후 항생제를 쓰거나 하는걸로 ...
답변 1  |  2010.10.30
Q. site-directed mutagenesis vs site-saturation mutagenesis ?!
그런데 용어 site-directed mutagenesis와 site-saturation mutagenesis 의미 차이가 뭔지 잘 모르겠습니다. 왜 이런 이름을 붙였는지 혹시 아시는 분 계세요?? ...
A.  목적에서 사용하는 방법이며 그 실험방법은 site-directed mutagenesis 방법과 동일합니다. 하지만 한부위의 아미노산을 정해진 다른 아미노산으로 바꾸는 것이 아니라 불특정한 다른 아미노산으로 바꾸는 ...
답변 1  |  2013.04.16
Q. 어느 특정 protein에 그역할을 담당하는 aa site를 찾고자 할때는 어떻게 접근해야 할까요? (mutagenesis)
kit가 있던데.. 어떤걸 선택해야 좋을까요? 만약 random mutagenesis kit를 사용하려면.. primer를 어떻게 잡아야 하는지 좀 알려 주세요.. manual에는 primer degin하는 방법이 자세히 안나와서요... 실험해보신 ...
A.  찾아보세요. Primer를 이용하는 방법도 있을 수 있으나 specific mutagenesis가 아니라면 primer조합을 짜기가 아주 어렵습니다 ...
답변 1  |  2007.03.07
Q. agilent quikchange site-directed mutagenesis..
밴드 하나만 제 자리에 나왔구요ㅜㅜ 이런 경우에도 mutagenesis가 잘 될 수 있을까요..? template 양은 100ng 사용하였습니다. 그리고 XL-1blue supercompetent cell 대신 dh5a사용하고, NZY+ broth도 없어서 그냥 LB하려 ...
A.  tool도 있으니 참고부탁드립니다. 그리고 SDM (site-directed mutagenesis)의 경우 transformation 효율이 중요합니다. DpnI 처리 후 잘 되지 않으면 굉장히 많은 colony가 생기고, DpnI이 처리가 잘되었으나 transformation ...
답변 2  |  2021.07.07
Q. mutagenesis 문제...
구입한거고... 만약 100번 aa을 다른걸로 바꾼후 120번 aa에 mutagenesis하려고 하면, 새로 첨가해서 반응한 120번 aa 프라이머까지만 제대로 dNTP가 붙는다는거죠.... 2. 그리고 차라리 이럴경우에 프라이머를 ...
A.  이걸 전혀 의심의 여지없이..하는 사람이 있기에..) quick mutagenesis 를 통해 증폭되며 mutation이 만들어지는 원리는 숙지 하셨겠지요? 1개를 완성해 놓고서..-sequence 확인하고.. 다음번 자리의 것을 또 그것을 ...
답변 1  |  2010.03.04
Q. site directed mutagenesis 프라이머 디자인 질문입니다!!
시켜도 가능한지 묻고싶습니다. 3. 그리고 혹시 site directed mutagenesis로 이 서열을 mutation 시키기 어렵다면 혹시 다른 실험으로 mutation 시키는 방법이 있는지 알고싶습니다 ...
A.   저는 ... AAA AAA TAA AAT AAA AAA ... 이런식으로까지는 site direct mutagenesis해봤습니다. 하나만 mutation시키는거에 비하면 좀 지저분하긴 했는데, 위에서 말씀드린것처럼 어쨌거나 원하는 크기의 band만 gel ...
답변 4  |  2021.12.27
Q. mutagenesis 실험이 안돼요... 도와주세염~~
프로토콜과 추천 부탁드려용... kit사용하지 않고 하는 mutagenesis시키는 방법은 복잡해 보여서 잘 모르겠더라구요.. 혹시 상세한 방법 가르켜주실수 있으신지.... 부탁드립니다.... 빨리 이 위기에서 ...
A.  안녕하세요. 저는 엔지노믹스(www.enzynomics.com)의 연구원 류기혁이라고 합니다. 저도 몇 년 전에 Stratagene 의 Kit를 이용해서 같은 실험을 했었는데요, 콜로니가 적게 나와서 여러번 반복실험을 했던 기억 ...
답변 3  |  2007.03.30
Q. Mutagenesis가 잘 안됩니다
stratagene quick change kit (200518)나 iNtRON의 Muta-Direct™ Site-Directed Mutagenesis Kit) 또한 Stratagene Manual에는 Falcon tubes와 NZY+ media 사용하라고 되어있는데요.. 혹시 eppendorf tube와 LB로 대신해도 되나요? 도와주세요 ...
A.   저도 stratagene quick change kit와 iNtRON의 Muta-Direct™ Site-Directed Mutagenesis Kit을 사용을 하는데 효율은 비슷한 것 같아서 Intron 제품을 사용하고 있습니다. 제도 그냥 e-tube와 LB를 사용했구요 com. cell은 DH5alpha를 ...
답변 2  |  2008.10.26
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S1000 | 경희대학교 국제캠퍼스 산학협력단 | 2008.06.13
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