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| Q. Quikchange site-directed mutagenesis에서 궁금한 점이 있습니다. |
| 판매하는 kit를 이용해서 mutagenesis하는 방법에서..
질문이 있습니다..(좀 엉뚱할 수도 있어요)
mutation 시키고자 하는 염기가 포함된 상보적인 primer를 이용해서
plasmid 전체를 PCR 하는데..
첫번째 cycle에서 ... |
| A. 그림을 그리면서 설명하면 쉬운데 글로는 설명하기가 어렵습니다.
최종적으로 PCR product는 양끝에 primer bind site를 중복해서 가지는 linear dsDNA가 만들어 질 가능성은 없나요?
-> 그럴 가능성은 없습니다. ... |
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답변 3 | 2007.12.15 |
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| Q. site-direct mutagenesis |
| PCR 을 이용한 mutagenesis보다 많은 장점이 있는건지?
mutagenesis방법으로 어떤 방법이 더 선호되고 있는지 알고 싶습니다,, ^ ... |
| A. 제가 이걸로 석사 학위 논문 썻습니다.
frame shift mutation을 일으킬 때 중요한 것은 ATG(start codon)이 적은 것을 택하는 것이 중요합니다. sequence를 보시고 엄한 product를 생산하지 않는 것이 중요할 것 같군 ... |
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답변 6 | 2007.03.27 |
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| Q. arabidopsis mutagenesis |
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무엇이 잘못된 걸까요?
mutagenesis를 잘못한 건지...mutagenesis후 항생제 있는 plate에 뿌리는게 아닌건가여?
2번째는 arabidopsis transformation을 수행하였는데여...(방법은 지금까지와 동일=이상없음)
항생제가 ... |
| A. EMS mutagenesis를 한 후, 바로 항생제가 포함된 solid media에 뿌리는게 아니라, mutagenized된 seed들을 흙에 뿌려서 키워야 하는걸로 압니다. 나중에 그 seed들이 자라서 seed을 얻은후 항생제를 쓰거나 하는걸로 ... |
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답변 1 | 2010.10.30 |
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| Q. site-directed mutagenesis vs site-saturation mutagenesis ?! |
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그런데 용어 site-directed mutagenesis와 site-saturation mutagenesis 의미 차이가 뭔지 잘 모르겠습니다. 왜 이런 이름을 붙였는지 혹시 아시는 분 계세요?? ... |
| A. 목적에서 사용하는 방법이며 그 실험방법은 site-directed mutagenesis 방법과 동일합니다. 하지만 한부위의 아미노산을 정해진 다른 아미노산으로 바꾸는 것이 아니라 불특정한 다른 아미노산으로 바꾸는 ... |
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답변 1 | 2013.04.16 |
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| Q. agilent quikchange site-directed mutagenesis.. |
| 밴드 하나만 제 자리에 나왔구요ㅜㅜ 이런 경우에도 mutagenesis가 잘 될 수 있을까요..? template 양은 100ng 사용하였습니다.
그리고 XL-1blue supercompetent cell 대신 dh5a사용하고, NZY+ broth도 없어서 그냥 LB하려 ... |
| A. tool도 있으니 참고부탁드립니다.
그리고 SDM (site-directed mutagenesis)의 경우 transformation 효율이 중요합니다. DpnI 처리 후 잘 되지 않으면 굉장히 많은 colony가 생기고, DpnI이 처리가 잘되었으나 transformation ... |
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답변 2 | 2021.07.07 |
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| Q. mutagenesis 문제... |
| 구입한거고...
만약 100번 aa을 다른걸로 바꾼후 120번 aa에 mutagenesis하려고 하면,
새로 첨가해서 반응한 120번 aa 프라이머까지만 제대로 dNTP가 붙는다는거죠....
2. 그리고 차라리 이럴경우에 프라이머를 ... |
| A. 이걸 전혀 의심의 여지없이..하는 사람이 있기에..)
quick mutagenesis 를 통해 증폭되며 mutation이 만들어지는 원리는 숙지 하셨겠지요?
1개를 완성해 놓고서..-sequence 확인하고..
다음번 자리의 것을 또 그것을 ... |
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답변 1 | 2010.03.04 |
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| Q. site directed mutagenesis 프라이머 디자인 질문입니다!! |
| 시켜도 가능한지 묻고싶습니다.
3. 그리고 혹시 site directed mutagenesis로 이 서열을 mutation 시키기 어렵다면 혹시 다른 실험으로 mutation 시키는 방법이 있는지 알고싶습니다 ... |
| A. 저는 ... AAA AAA TAA AAT AAA AAA ... 이런식으로까지는 site direct mutagenesis해봤습니다. 하나만 mutation시키는거에 비하면 좀 지저분하긴 했는데,
위에서 말씀드린것처럼 어쨌거나 원하는 크기의 band만 gel ... |
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답변 4 | 2021.12.27 |
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| Q. mutagenesis 실험이 안돼요... 도와주세염~~ |
| 프로토콜과 추천 부탁드려용...
kit사용하지 않고 하는 mutagenesis시키는 방법은 복잡해 보여서
잘 모르겠더라구요.. 혹시 상세한 방법 가르켜주실수 있으신지....
부탁드립니다....
빨리 이 위기에서 ... |
| A. 안녕하세요. 저는 엔지노믹스(www.enzynomics.com)의 연구원 류기혁이라고 합니다.
저도 몇 년 전에 Stratagene 의 Kit를 이용해서 같은 실험을 했었는데요, 콜로니가 적게 나와서 여러번 반복실험을 했던 기억 ... |
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답변 3 | 2007.03.30 |
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| Q. Mutagenesis가 잘 안됩니다 |
| stratagene quick change kit (200518)나 iNtRON의 Muta-Direct™ Site-Directed Mutagenesis Kit)
또한 Stratagene Manual에는 Falcon tubes와 NZY+ media 사용하라고 되어있는데요.. 혹시 eppendorf tube와 LB로 대신해도 되나요?
도와주세요 ... |
| A.
저도 stratagene quick change kit와 iNtRON의 Muta-Direct™ Site-Directed Mutagenesis Kit을 사용을 하는데 효율은 비슷한 것 같아서 Intron 제품을 사용하고 있습니다. 제도 그냥 e-tube와 LB를 사용했구요 com. cell은 DH5alpha를 ... |
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답변 2 | 2008.10.26 |
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