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실험Q&A    828건 정확도순 날짜순
Q. subcloning 마지막 확인 단계인 plasmid cutting시 band 양상이 이해되지 않아 질문드립니다.  |  첨부파일 첨부파일
linear plasmid, supercoiled plasmid로 나뉜 3개의 band로 나타난 양상과 ... 위의 사진에서 supercoiled plasmid로 하나의 band만 나타난 것이라고 가정했을 때 왜 enzyme으로 cutting했을 때 아래 사진과 같은 양상으로 ...
A.  cell은 어떤 것을 사용했나요? 위의 gel에서 나온 plasmid는 1개만 제외하고 진한 band가 CCC form으로 본다면 subcloning이 된 위치에 나온 것으로 보입니다 ...
답변 1  |  2020.07.24
Q. band가 왜 3개일까요? (plasmid 확인시)
minispin prep을 사용하고 있습니다. PCDNA/SP1 plasmid를 2개의 제한효소로 자르는 데 이전에는 같은 조건에서 5.4kb와 2.7kb band가 잘 나왔는 데 이번에는 그 사이에 5미만의 band가 하나 더 생깁니다. 부디 ...
A.  non-cutted plasmid 라고 생각이 되네요. enzyme 의 활성이 조금 떨어졌거나 아님 ... 않으셨는지 확인 해보세요. 제 생각에는 잘리지 않은 plasmid가 남아서 그렇게 보이는것 같습니다. plasmid가 liner 보다 빨리 ...
답변 3  |  2006.09.14
Q. plasmid DNA vector 가 2 band 가 뜨면요?  |  첨부파일 첨부파일
plasmid DNA vector 를 3M paper 에서 elution 하여서. transformation ... DNA 가 맞는지...enzyme site 로 cutting 하였는데... 1 band 가 뜰줄 알았는데..2 band 가 뜨고...위치도 달라서... 그냥 뽑은 DNA 를 걸었거든요!! 그럼 분명 ...
A.  pattern을 보이고 있으며 이건 plasmid를 뽑을때에 CCC와 OC form의 두종류가 나온 겁니다. 대략 예상되는 plasmid의 크기는 7-8kb 정도가 될것으로 ... 너무 많이 걸지 마세요. DNA band가 뭉태기로 나와서 크기 ...
답변 1  |  2010.05.13
Q. plasmid prep 후 농도와 plasmid band 패턴이 관련이 있을까요?
가장 많은 일반적인 plasmid band 패턴이었습니다! 수율이 낮은 것과 plasmid band 패턴이 이상한 것이 관련이 있을까요? 아무리 서치해봐도 속시원한 답이 나오지 않네요,, 혹시 이런 경우가 있었던 분이 ...
A.  - 농도와 패턴은 상관 관계가 크게 없습니다. - 농도 : 추출 수율과 관련 - 패턴 : 추출 과정이 smooth 또는 rough한지에 관련
답변 1  |  2022.07.19
Q. midi prep 후 gel loading 했는데 이상한 band가 있어요  |  첨부파일 첨부파일
500bp 위치에서 선명한 또다른 band가 보이더라구요 qiagen kit로 ... 봤더니 똑같더라구요. 여튼. plasmid DNA를 prep하고 나서 보관중에 이런 band가 나타나는건 무엇때문인가요>? 혹시 다시 cloning을 해야 되는 ...
A.  너무 감사합니다. 이거 때문에 며칠 잠도 설쳤더니.. 이제야 조금 안심이 되네요.. 정말 감사합니다.
답변 2  |  2011.02.16
Q. plasmid band 아래에 band가 뜨는게 이게 대체 뭔가요?  |  첨부파일 첨부파일
뒤, white colony를 incubation해서 plasmide extraction을 시행했습니다. 그런데 이 plasmid를 1% agarose gel에 loding 하니 진한 band 아래에 다른 band가 보이네요. 이 band의 정체가 뭔지 모르겠어서 질문 드립니다 ...
A.  CsCl ultracentrifuge 하면 없어집니다. 그거 denature 된 single strand plasmid 입니다. Plate 에서 갓 자란 colony 를 키워서 plasmid prep 을 하면 저런 형태가 거의 안보이지만 상태가 좋지 않은 cell에서 prep하면 자주 ...
답변 3  |  2021.05.31
Q. plasmid DNA 전기영동 실험 도와주세요ㅜㅜ  |  첨부파일 첨부파일
plasmid DNA 전기영동 실험 관련해서 ... 않은 lane에서는 맨 위쪽 band는 재조합된 plasmid DNA-대략 8kb, 그 아래는 첨가되지 않은 plasmid DNA-대략 5~6kb라고 생각했고요 둘 다 처리한 lane에는 맨 위쪽은 역시 잘리지 ...
A.   지금 사진 해상도가 많이 낮고, DNA ladder의 각 band size가 확인이 안 되긴 합니다만, plasmid DNA를 그냥 달리면 보통 2개 band가 보이는데요, 그건 별로 안 중요합니다. EcoRI과 XbaI으로 single cut 했을 때, DNA가 ...
답변 3  |  2013.05.17
Q. plasmid 전기영동에 대해서 궁금해요..  |  첨부파일 첨부파일
22 plasmid 를 제한효소처리를 하면 정확하게 약 4kb 위치에 band가 나와요... 그런데 plasmid를 제한효소 처리를 안하고 전기영동을 하면 사진과 같이 band가 나와요... 제가 궁금한건 4kb위치한 band가 OC로 판단 ...
A.  처리했을때 4kb 위치에 band가 나왔다면 open circular form의 경우 크기때문에 ... 4kb보다 더 작게 나오죠.. 10kb이상의 크기는 plasmid prep시에 딸려온 chromosomal DNA의 일부가 아닌가 생각됩니다.^ ...
답변 2  |  2006.10.03
Q. plasmid dna 전기영동
plasmid miniprep 해서 gel 을 걸어보면.. (Tvector, insert ligation 한 plasmid 입니다) 원하는 위치에 band 가 나오는데 위에 규칙성 있는 간격으로 희미하게 세개정도가 더 나오는데요.. 사다리처럼.. 원하는 진한 band ...
A.  맨 밑에 사이즈가 제일 작은 것이 supercoiled plasmid 입니다. 가운데는 nick.. 맨 위는 linear.. 그리고 supercoiled plasmid가 많을수록 잘뽑은 것(?) 이지만.. 3개가 나온다고 해서 실험하는데 지장은 없습니다..
답변 2  |  2009.04.30
Q. plasmid mini prep band 확인 부탁드려요..  |  첨부파일 첨부파일
LB배지에 cell 외에 찌꺼기가 좀 있는거 빼고는 Protocol 대로 실행했구요 band가 너무 지저분한게 왜일까요; white colony 로땄습니다. ...
A.  sol1에 RNase를 첨가하셨나요?? 꼭 RNase 컨템처럼 보이네요..
답변 5  |  2009.07.19
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