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정확도순 ㅣ 날짜순
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| Q. Wet Transfer system 및 Semi-Dry Transfer의 차이 |
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단백질 블롯팅시
Wet Transfer system 및 Semi-Dry Transfer 가 있는 ... 사용하지 않고 Wet Transfer system (바이오래드 제
품^^)만 사용하네요. 한번 써보고 싶은데 쓰기전에
궁금해서 이렇게 올려봅니다.
답변 꼭~ ... |
| A. 그냥 buffer에 담그느냐 아니면 소량의 buffer를 적셔서 하느냐의 차이입니다.
효율 차이는 있을 수 있는데요. 저같은 경우에는 semi-dry에서도 1시간 정도면 충분하게 옮겨지더군요.
대상 단백질에 대해서 ... |
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답변 1 | 2006.03.17 |
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| Q. western transfer질문이요... |
| 넣지 않았습니다.
transfer system은바이오 라드의 TANK TRANSFER SYSTEM (WET)을 쓰고 있습니다..
근데 궁금한게 있는데..
젤의 두께가 두꺼우면 암페어도 올려야 하나요?
아님 프로테인 사이즈에 따라서 암페어도 ... |
| A. 선생님께서 보시려고 하는 size의 size marker 분리가 되었을때 transfer하는것이
더 확실할것같습니다.
최대한 벌려보고..
트랜스퍼 조건도 다시 잡아보시는게 어떠시련지요..; ... |
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답변 4 | 2010.02.19 |
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| Q. Western Blot 고분자량 단백질 Transfer 안됨.. |
| 않습니다.
(Marker로 확인)
Transfer Buffer는 MeOH 20% 넣어서 쓰고, PVDF ... 사용했습니다.
BIORAD Mini-Protean System 이라는 장치를 쓰고요,
SDS-PAGE와 ... 안에거만 바꿔서 WET 방식으로 Transfer 하는 장치입니다.
가령 25 ... |
| A. 젤 %가 높으면 고분자 영역이 잘 넘어가지 않습니다.
모두 transfer 하시려면 O/N 하셔야 좋을 듯 합니다.
그러나 위쪽 부분이 원래 분석하는데 필요하지 않으시면 굳이 신경쓰지 않으셔도 될 것 같습니다. |
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답변 4 | 2011.10.25 |
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| Q. transfer(western) |
| 안나타나는데...
그리고 size가 작아 tricine buffer system으로 잡으니 정말 tris-glycine으로는 분리가 안되던 ... 된것으로봐서는 뭉쳐있는 것은 아니겠지요??
transfer는 100mA로 90분정도 하고 있는데 gel을 ... |
| A. 잘 썩거든요. 썩은거는 냄새맡아보시면
알수 있구요.
Transfer 를 long time으로 하더라도 사이즈가 작다고 잘 빠져나가거나
하는 편은 아닌데요. volt를 30으로 낮추고 오버나이트도 해보시고
여러 조건으로 ... |
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답변 2 | 2007.07.11 |
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| Q. western할때 transfer 이 두판밖에 안됩니다 ㅠ |
| 우선 gel은 4개 만들어놓으려고 하는데
러닝 기계는 한번에 4개가 돼서
가능하면 러닝 4개 하고
트랜스퍼를 2개씩 나눠서 하는 방법은 없을까요? |
| A. 러닝은 4개가 되는데, 블로팅은 2개만 된다는 것은,
가능한 실험캐파가 2개라는 뜻입니다.
4개를 한번에 하려는 생각을 버리고 2개씩만 하시죠.
4개를 다 망치는 것보다는 2개의 데이터를 얻는 것이 ... |
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답변 7 | 2022.11.28 |
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| Q. northern blot |
| Trans-Blot® Turbo™ Transfer System이 기계를 사용하여 transfer하려고 하는데요 northern blot할때 쓰이는 membrane을 이걸로 써도 되나요?
http://www.bio-rad.com/ko-kr/product/electrophoresis-blotting-apparatus/trans-blot-turbo-transfer-system |
| A. 링크페이지 안들어가보고 답변드립니다.
그냥 southern blotting하는 memb. 사용하면됩니다.
하실때 RNA degredation되지않게 조심하시고요. |
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답변 1 | 2013.11.29 |
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Q. Dig labelled EMSA 사진좀 봐주셔요. |  첨부파일 |
| 너무 separating되지 않았는데요, Dig label system으로emsa하려면 membrane transfer해야 되는데, membrane이 5%이다보니 너무 잘 찢어져서요, 큰 gel은 더 잘 찢어져서 도저히 자신이 없는데요, 어떻게 해야 하나요? ... |
| A.
그냥 레이블 안된 DNA조각으로 EMSA를 실시하고
gel을 Transfer 한 후에 DIG-labelled probe로 southern hybridization을 한번 시도해 보겠습니다 ... |
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답변 3 | 2008.08.05 |
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| Q. 제가..외국에 어느 실험실에 antiserum을 부탁드렸는데요.. |
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지금...졸업논문실험을 진행중인데..
pathogen transfer system에 대한 논문입니다..;;
사수 선생님께서...western도 추가하라고 하셨는데..
제가 필요한 antibody가 어떤회사에도 없고..만들려고 하니
시간이 ... |
| A. 전혀 아니라고 봅니다.
그렇지만, 11개나 되는 antibody를 받으신다면, 그냥 감사~하고 넘어가기엔 힘들다고 보이네요...
사람에 따라 틀리겠지만, 그걸 주는건 별 문제가 아니라 봅니다.
헌데.. 님께서 논 ... |
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답변 1 | 2006.02.16 |
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