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| ⓘ 'Cloning' 관련 검색광고입니다. |
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DNA Substrate Type에 따른 NEB 사의 ligase 제품을 써보시고 Cloning 효율을 높여 보세요!! |
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| 3,894건 |
정확도순 ㅣ 날짜순
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| Q. transformation 질문입니다. |
| transformation을 하던데, 제가 만든 컴셀로 이런 방식으로 transformation할 수는 없는건가요?
궁금해서 여쭤봅니다 ... |
| A. 방법, Hanahan 방법 등이 많이 쓰입니다.
하지만 일반적으로 transformation 효율은 electroporation 방법이 훨씬 좋습니다.
(http://bric.postech.ac.kr/myboard/list.php?Board=protocol&pkno=128 ... |
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답변 3 | 2011.01.07 |
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| Q. transformation이 안돼요 ㅠㅠㅠㅠㅠㅠㅠ |
| transformation을 하는데 잘 안되서 이렇게 글을 올립니다. ㅠ
colony가 도무지 뜨지 않아서요 ㅠ
제가 사용 ... transformation이 안되는거 같아요 ㅠ
고수님들 ㅠ
이런경우 transformation 을 어떻게 해야 할까요 ... |
| A. 항생제가 amp라면 incubation을 빼버리고 깔아보세요.
그리고 com cell 효율도 한번 측정해 보시는 것이 좋을 것 같습니다. |
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답변 3 | 2010.07.19 |
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| Q. transformation후 colony가 저만 안떠요.. |
| 저는 8개 뜨고 선생님은 50개 이상 뜹니다..
아무래도 transformation에 문제가 있는 것 같은데 선생님과 바로 옆에서 진행했기 때문에 같은 컴셀 사용, 시간, 조건 모두 똑같았습니다.
컴셀 넣고 탭핑 후 ice ... |
| A. cempetent cell은 따로 사용하시는 건가요? |
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답변 3 | 2019.02.03 |
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| Q. bl21 transformation 콜로니가 안뜹니다. |
| transformation하였는데, colony가 아예 뜨질 않습니다. 일주일째 transformation만 하고 있는데, 어디서부터 잘못된건지, 혹은 이런 경험이 있으셨던 분들, 조언 부탁드립니다 ... |
| A. 그리고 BL21에 transformation하면 됩니다. 일반적인 single transformation보다는 많은 양의 플라스미드를 사용하세요. 500ng~1ug씩 (듬뿍듬뿍) 각각 섞어서 transform하면 됩니다.
Kan이 있으니 heat shock후에 1시간 이상 ... |
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답변 2 | 2016.09.08 |
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| Q. Transformation 계산 방법이 잘 이해가 안됩니다. |
| 안되기도 하고요.
혹시 이것과 관련해서 이 공식이 어떻게 transformation efficiency를 설명하는 것인지.. 왜 CFU/ug을 unit으로 쓰는지 알려주실 분 계실까요?ㅜㅜ
upload ... |
| A. 사용된 competent cell의 전체 수에서 transformation된 세포의 수를 말하는 것이니까
: CP cell 수는 고정되어 있고 사용한 plasmid 양에 따라 TF된 cell 수가 달라지기 때문에 TF 효율로 사용하기에는 힘듭니다.
- ... |
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답변 1 | 2022.11.18 |
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Q. transformation 효율 비교 결과에 대해 질문이요! |  첨부파일 |
| 넣었습니다..
이 사진을 보며.. 제가 구입한 TA vector가 transformation 효율이 정말 낮구나..
c.cell 을 같이 판매하던데 살까...로 생각할 수 있는 결과인지 궁금합니다.
직접 세어보았을 때.. TA vector는 clonly가 ... |
| A. 실제로 실험을 하면 self ligation이 일어나죠...
아마튼 transformation 했을 때 거의 colony자체가 뜨지 않았다면 ligation mixture에 ligase 저해물질이 포함된 것으로 보입니다.
insert인 PCR product를 깨끗이 정제하시고 ... |
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답변 1 | 2009.08.05 |
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| Q. BL21(DE3) transformation이 안됩니다.... |
| 발견되지 않아서 양을 늘리게 되었습니다.
BL21(DE3)로의 transformation이 너무 안됩니다 ㅜ 2주째 그러니깐 스트레스 받아요...... DNA의 양을 늘리는게 맞는 답일까요.. ... |
| A. 조건은 컴셀 100 L + DNA 10 L (100 ng) 입니다.
제가 BL21(DE3)로의 transformation을 아무것도 모른 상태에서 처음 해보았을 때, DNA를 10 L(600 ng)을 넣었을 땐 콜로니가 나왔었거든요 ㅜ
그런데 다른 실험 프로토콜을 ... |
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답변 8 | 2022.04.08 |
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| Q. ligation후에 transformation하고 나서 뜨는 콜로니 |
| transformation하면 이런경우가 있나요?
ligation후에 transformation하고 나서 뜨는 콜로니는 크기가 거의 일정한가요?
콜로니를 보면 어떤건 큰데 어떤건 작습니다. 작은 콜로니는 satelite는 아닙니다 ... |
| A. yeast contamination으로 보입니다. 오염에 좀 더 주의하면서 해보시고 그래도 그렇다면, 그리고 competent cell을 만들어서 사용하신다면 그 자체가 오염되어 있을 수 있겠네요. |
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답변 2 | 2011.07.12 |
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| Q. Transformation 효율이 너무 안좋습니다.. 저와 비슷한 경험 하신분 있으신가요??ㅠㅠ |
| marker는 ampicilin을 이용하였구요.. 새로 산 DNA가지고도 transformation을 했는데 하나도 자라질 않았네요.. 일단 저희 학교 내 실험실에서 해볼 수 있는 모든 경우의수를 다 해보았는데 도저히 돌파구가 ... |
| A. 날이 추워지면서 랩의 온도가 낮아지면 lysis 버퍼가 결정이 생기는데.. 그걸 그대로 사용한건 아닌지요...
프렙 하시기전에 솔루션들이 모두 잘 용해 되어 있는지 확인해 보시는걸 추천드려요. |
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답변 5 | 2022.11.29 |
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