|
|
|
|
| ⓘ 'Western' 관련 검색광고입니다. |
|
 |
Westetn blot (WB) imaging system |
|
|
|
|
| 8,859건 |
정확도순 ㅣ 날짜순
|
| Q. western blot시 antibody |
| western blot을 하고 있는데요;
1st ... .;
이렇게 해도 western blot하기엔 괜찮은 건가요?
아님 his tag을 떼고 antibody를 만들어야 하나요? ... |
| A. 만들어진 항체가 his는 못잡고 target만 잡는다면 문제가 없을 듯 하구요.
만약을 his를 잡고 그것이 문제가 된다면, his affinity column 또는 his를 떼낸 antigen affinity column을 만들어서 항체를 정제하면 될 것 ... |
|
답변 2 | 2007.04.03 |
|
| Q. 큰size 단백질의 western blot 질문입니다..도와주세요..ㅠㅠ |
| 석사1학기 학생입니다.. ^-^;;
western blot을 하고있는데요..
맨 처음단계부터 어렵게!!어렵게!! 조건을 잡아서 열심히 실험중에 있습니다..
제가 지금까지 봐왔던 단백질 사이즈는 약 70~75KDa정도 이구요..
... |
| A. size 90~100kDa정도는 8%정도의 gel로 내린후 1시간 transfer하시면 됩니다.
transfer시 전류는 단백질 size에 관련되서 변화를 주는 것이 아니라 전체적인 gel size에 대해 바뀌는 것입니다. 가로x세로x0.8+10mA를 기 ... |
|
답변 3 | 2008.08.05 |
|
Q. western blot 밴드가 이상합니다. ㅜ (그리고 western blot시 주의사항도 알려주세요) |  첨부파일 |
| western blot할 때 항상 첫번째 ...
이외에도 혹시 western blot할 때 특별히 주의해야할 사항들도 있으면 알려주세요
실험에서 5% skim milk사용했고 primary ab는 4도 O/N, secondary ab는 실온 1시간 붙였습니다 ... |
| A. 질문자님//알겠습니다.
근데 tubulin이 동일하게 나오면 같은 브랏에서의 다른 밴드를 western 상의 오류로 보기에는 무리가 있습니다. 그것도 항상그렇게 나온다면.. 실험시스템을 둘러보는것이 옳을듯.. |
|
답변 6 | 2013.02.28 |
|
| Q. Western blot 실험 후 background가 검정색으로 나옵니다~ | 첨부파일 |
| Western blot을 처음 실험하는 학생입니다.
실험 후 detection은 암실에서 진행하고 있는데요. detection하면 membrane 부분이 검정색으로 나옵니다.
밴드는 검출되지 않지만 1차 항체 농도를 바꿔봐야 할 것 ... |
| A. 1차 2차항체 모두 blocking solution 에 넣으시구요
blocking time도 늘려보세요.
그다음에 antibody dilution 비율도 높여보시구요 |
|
답변 3 | 2015.01.02 |
|
| Q. western blot : transfer 질문입니다~ | 첨부파일 |
| ? western blot에 어려움을 겪고 있는 석사생입니다~
SDS gel을 runnning 하고 NC membrane에 transfer를 하는데요~
transfer하고 난 뒤 폰슈 염색을 하면 (사진처럼) 자꾸만 깨끗하게 transfer되지가 않아서요ㅠㅠ ... |
| A. 저도 저렇게 나왔던 적이 있었는데,
카세트가 낡아서 멤브레인과 겔을 꽉 잡아주지 못해서
그런 것 같더라구요~
카세트 새걸로 교체하고 조립할 때도 스펀지에 버블 좀 눌러서 빼준 후에
조립해서 ... |
|
답변 5 | 2015.10.29 |
|
| Q. western blot 관련 질문입니다.. 가르쳐주세요.. ㅜㅜ |
| western blot에 대해 실험을 하기 ... 이유가 무엇인가요?
또, western blot으로 항체로 사용되어 지는 특정 물질을 검색하는 것은 불가능한가요? 그러니깐 정제되어진 단백질에 원래 결합하는 물질 대신에 ... |
| A. 항체가 무엇인지부터 공부가 필요하실것 같습니다.
면역학 등에 문외한 이시라면 이런것부터 공부하시는게 좋을것 같습니다. |
|
답변 4 | 2007.03.07 |
|
| Q. western blot시 secondary Ab에 대한 질문인데요~ |
| histone phosphrylation정도를 western blot으로 확인하려고 하는데 western blot이 초보라 하면서 궁금한것이 많습니다...
1. 제가 지금 secondary Ab를 구입한게 아니라 연구실에 있는것을 쓰려고 하는데요
지금 다시 ... |
| A. 혹시 gamma-H2AX 보시나요?
저도 그거 많이 보는데. 반가워요~
1번 질문은 아마 상관 없으실 듯 하구요,
2번 질문은.. skim milk 보다 BSA가 더 좋습니다.
통상 3개월 정도는 괜찮구요,
얼려서 쓰셔도 되더군요. ... |
|
답변 2 | 2009.02.13 |
|
| Q. Western blot 샘플에 문제가 있는 것 같습니다. |
| 현재 western blot에 문제를 겪고있는 학생입니다.
Western blot 전에는 Bradford assay를 통해서 단백질 측정을 진행했고 595nm 흡광도 상에서 Blank를 제외한 값으로 계산하여 단백질 농도값을 확인했습니다.
Brad ... |
| A. 제시한 방법에는 문제가 없습니다.
쿠마시 블루 염색에서 밴드가 없다면 샘플에 단백질이 없었던것 같네요.
detergent에 의해 bradford 간섭은 없었을까 의심만 해봅니다. |
|
답변 4 | 2019.10.29 |
|
| Q. 관절염 동물실험 및 western blot, RT-PCR 관련 궁금증이 많습니다. ㅠ.ㅠ |
| 짠 상황입니다...
western blot이랑 RT-PCR도 해야하는데 ... RT-PCR ; COX-2, 5-LO, iNOS
Western blot ; COX 2, iNOS, NF-kB
이정도로 실험해도 괜찮을까요?
골관절염 실험에서 중요하게 보는 factor가 어떤 것인지 잘몰라서 ... |
| A. 세포사멸 관련 실험으로 주로하는 것은 western blot, RT-PCR을 사용하고 있고, 염증반응 관련 인자로는 위에서 말씀하신 COX-2(COX-1은 안보셔도 될 듯합니다), PGE2를 보고 있습니다. signal은 너무나 다양하나 ... |
|
답변 6 | 2009.03.17 |
|
| Q. western blot 결과가 잘 안떠요.. |
|
.. 주위 사람들이 western blot 할때는 챔버에 넣어서 ... 실온해서 했거든요 .
western blot 결과가 온도에 영향을 받는지.
궁금해서 질문 드립니다 ... |
| A. 몇몇의 antibody datasheet를 보면 4도에서 Western blot을 하라고 명시되어 있는것도 많습니다
또한 4도에서 하면 항체 회수율도 좋긴 합니다
실온에서 해도 잘 나옵니다 하지만 보관했다 다시 사용하고 하는 ... |
|
답변 1 | 2009.05.21 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
| [공지] 한국연구재단 검색은 해당 시스템 종료로 인해 서비스 종료되었습니다. |
|
|
|
|
|
