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'Western' 관련 검색광고입니다.
Westetn blot (WB) imaging system
실험Q&A    207건 정확도순 날짜순
Q. westernblot 실험시 전기영동 관련 질문
안녕하세요. 선배님들~ 저는 지금 석사 2학기에 접어든 대학원생입니다. westernblot 실험을 하면서 궁금한 점이 ... 암페어) 단위로 맞추는게 맞는 것인지도 궁금합니다... westernblot 고수님들의 도움 ...
A.  암페어 를 constant로 설정하는 경우 gel 1판당 암페를 설정해 주시는게 맞습니다. 그리고, volatage 를 constant로 설정하시는 경우 gel 갯수 상관 없이 동일 voltage로 내리시면 됩니다. 시간은 보통 dye가 빠지 ...
답변 1  |  2016.09.05
Q. secretion protein 측정시 ELISA 와 westernblot 의 차이점
level 이 어느정도냐에 따라서 secretion 되어지기 때문에 westernblot 결과와 ELISA의 결과가 어느정도 유의성이 맞아야 하는건 아닌가요? 혼자서 머리 쥐어짜면서 고민은 하는데 별 소득은 없고해서 답답한 ...
A.  다른건 모르겠고 발현정도와 secretion 정도에 대해서만 말씀드리죠 발현정도와 secretion 정도는 당연히 틀릴수 있습니다 단백질의 발현은 cytosol에서 만들어져서 ER-> Golgi등을 통해서 원하는 위치에가서 ...
답변 3  |  2008.06.13
Q. westernblot 결과 문제
westernblot에 대해 궁금한 점이 있어 질문올립니다.. 1. transfer한 후 ponceau로 membrane을 염색해서 band를 확인하는데... band가 뚜렷이 보이지 않고 band사이에 하얗게 세로줄이 있어요~~ 무슨 불순물이 끌고 ...
A.  band 사이에 하얗게 줄이 생기는건 단백질이 고르게 내려오지 않은게 아니라 transfer할때 문제가 있어서 나타난 것으로 생각됩니다. 그리고 ECL이 지저분하게 나올때도 있고 안나올때도 있는건 저같은경 ...
답변 5  |  2007.03.10
Q. westernblot의 transfer에서, gel을 뒤집어 넣어도 될까요?
westernblot에서 SDS-PAGE를 끝내고, transfer로 옮기는 과정에서 평소와 다르게 gel이 반대편 유리판에 붙어버려서, 다시 반대편으로 옮기면 gel이 잘못될 것 같아 그대로 membrane을 올리고 transfer를 ...
A.  X-ray film의 좌우만 바뀌므로 상관 없습니다.
답변 1  |  2018.07.13
Q. WesternBlot 젤 흔들림 오류 해결방법을 알려주세요  |  첨부파일 첨부파일
안녕하세요 WesternBlot으로 실험을 하는 학생입니다. 제가 10%,12% gel을 만들때는 괜찮은데 항상 8% gel을 만들때면 윗부분이 꺾이거나 휘어지는 현상이 발생합니다. 굳히는 시간도 늘려보고, 위에 DW도 ...
A.  저도 Transfer가 가장 의심스러워서 교수님도 제가 하는 거 직접 보셨는데 그 과정에는 문제가 없다고 하셨는데 혹시 stacking gel 덜 자르면 저렇게 되나요??
답변 3  |  2021.03.19
Q. Westernblot Transfer 할 때 ice pack...
Westernblot Transfer, BIORAD 제품 사용하고 있습니다. Transfer를 할 때 buffer가 뜨거워지지 말라고 ice pack(하단 이미지 왼쪽 끝)을 http://www.biorad.com/cmc_upload/Products/-9281/mini_transblot.jpg 넣어 주는데 이 pack 가운데 ...
A.  예전에는 오른쪽 통을 스티로폼에 담아 얼음을 채워서 사용했습니다. 급하게 사용하시려면 이런 방법도 있다 알아두시면 될 것 같네요. 그리고 저 아이스팩이 transfer 카세트에 딱 맞는 것을 제외하면 ...
답변 2  |  2021.11.24
Q. westernblot saple을 준비하던 중 궁금한 것이 있어 질문드립니다.
westernblot saple을 준비하던 중 궁금한 것이 있어 질문드립니다. mouse tissue (spleen, liver, brain 등)에서 lysate를 만들어 쓰려고 하는데 lysis buffer로 RIPA buffer를 많이 쓰시더라구요.. Sodium Chloride ---------------- 150 ...
A.  inhibitor cocktail 은 사용하시는 회사 제품에 working concentration이 나와있을거에요 브레인에 특화되게 사용하는 버퍼가 있는지는 모르겠습니다. 예전에 조직을 깰 때 모두 같은 버퍼를 썼던 기억이 있네요
답변 1  |  2011.04.13
Q. westernblot 질문입니다.  |  첨부파일 첨부파일
eNOS 의 phosphorylation form (thr/ ser) 를 westernblot으로 확인하는 실험을 하고 있습니다. 그런데 total ... 나오는 이유가 무엇인지 궁금합니다. 또 eNOS phospho form 을 westernblot 해보신분들의 조언 부탁드립니다 ...
A.  예전엔 나왔다가 요즘들어 안나온다고 한다면, 혹시 오래된 antibody 문제가 아닐까요?...
답변 4  |  2007.01.23
Q. westernblot에서 anti body
westernblot에서 anti body부칠때요 가령 Primary GST-Momo이면 2nd 도 mono처리해야 되죠? Primary,secondary를 poly쓴다면 MONO와 차이점은요? 또 1st는 mono쓰고 2nd는 poly쓴다거나 이렇게 섞어서 쓰면 안되는지요?
A.  공부하세요~^^ 농담입니다. 개념 혼동이 있으신듯... Mono, poly는 antibody가 monovalent인지 아니면 여러 antibody가 섞여있는지를 나타낸 것일뿐 primary, secondary antibody를 쓰는데에는 아무 상관도 없는겁니다.
답변 5  |  2006.07.06
Q. westernblot 할때 Ab로 단백질 detection 이해가 안되요..ㅠㅠ
안녕하세요~ 석사생활 시작한지 2달 되는 초짜대학원생입니다..ㅠㅠ 저희 실험실에서는 cell 에 GFP를 transfection 시켜서 IP 를 하고 western 을 하는데요. IP 에서 GFP Ab 쳐서 bead 붙여서 가라앉히는 것은 이 ...
A.  GFP와 SUMO의 관계가 아니라 GFP에 붙어 있는 어떤 단백질과 SUMO의 관계일 겁니다. 이를 가령 A라 했을때 GFP-A가 SUMO와 결합을 한다면 세포내에서 GFP-A/SUMO는 complex를 이룰 것이고 여기에 GFP antibody를 사용하 ...
답변 4  |  2008.02.27
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